抗原上那部分可以引起機體產生抗體的分子結構,叫做抗原決定簇。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇,因而使機體產生好幾種不同的抗體,最終產生出抗體是漿細胞。在同一種抗原決定簇,在機體內也可以由好幾種克隆來產生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體 (polyclonal antibody)。
優點:
多克隆抗體可識別任一抗原上的多個表位,因此具有以下優點:
高親和性:由于靶蛋白上的多個表位能夠結合不止一個抗體分子,多克隆抗體可放大低表達水平靶蛋白的信號。但是,這會影響定量實驗(如流式細胞術實驗)結果的準確性。
可識別多個表位,有利于免疫沉淀 (IP) 和染色質免疫沉淀 (ChIP) 實驗獲得更好的結果。
與單克隆抗體相比,對微小抗原變化(例如多態性、糖基化異質性或者輕微變性)的包容性更強。
可識別與免疫原蛋白質具有高度同源性的蛋白質,還可用于篩查非免疫原物種的靶蛋白。
通常是檢測變性蛋白質的shou選。
多表位通常可提升檢測的穩定性。
缺點:
易產生批次間差異。
產生大量非特異性抗體,可能會在某些應用中產生背景信號。
由于具有多個表位,檢測免疫原序列的交叉反應性非常重要。
不適用于探測抗原的特定結構域,因為抗血清通常會識別多個結構域。