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      各種抗體的保存簡述
    1. 發布日期:2025-07-01      瀏覽次數:31
      •   抗體的保存:
         
          1、酶聯抗體:保存在4℃,避免凍存以降低或喪失酶活性;
         
          2、偶聯抗體:需保存在棕色管或是用錫箔紙避光于4℃保存,熒光抗體對光敏感,操作時應嚴格避光;
         
          3、IgG3的同型對照:保存于4℃避免凍存,反復凍融會導致抗體變性,形成多聚體;
         
          抗體保存其他信息:
         
          1、加入甘油:對于大多數抗體,可加入50%的甘油來避免反復凍融。甘油在-20℃可降低冰點,但不建議加入甘油的抗體保存于-80℃,該溫度已經超過了甘油的冰點;
         
          2、加蛋白保護劑:蛋白在高濃度時不易降解,正如有些抗體會加入BSA作為穩定劑的原因,同時加入蛋白也可減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來標記的話,則不能加入蛋白穩定劑,因為這些穩定劑會和抗體一起競爭結合標記物。
         
          3、加入疊氮化Na:為了防止微生物污染,經常選擇加入疊氮化Na到抗體中(終濃度 0.02% (w/v))。但在下述情況中不能使用疊氮化Na:
         
          1)、抗體用于染色或處理活細胞,用于體內研究。疊氮化Na在抵抗微生物的同時,對其它大部分有機物也是有毒的,因為它阻斷了線粒體的 細胞色素電子傳遞系統cytochrome electron transportsystem。
         
          2)、要偶聯帶有氨基的抗體。疊氮化Na會干擾任何含有氨基的偶聯,因此在進行偶聯之前,應將疊氮化Na去除。偶聯后的抗體可以加入疊氮化Na保存,但是濃度只能是0.01%。對于需要偶聯的抗體,硫柳汞 (merthiolate)可以替代疊氮化Na作為保護劑。
         
          此外,如果需要去除疊氮化Na,可以通過凝膠電泳或過濾的方式(IgG 的分子量是 150kDa,疊氮化Na的分子量只有65Da),使用cut off 14kDa的濾膜即可將疊氮化Na從抗體中去除。
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