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各種抗體的保存簡(jiǎn)述
  • 發(fā)布日期:2025-07-01      瀏覽次數(shù):523
    •   抗體的保存:
       
        1、酶聯(lián)抗體:保存在4℃,避免凍存以降低或喪失酶活性;
       
        2、偶聯(lián)抗體:需保存在棕色管或是用錫箔紙避光于4℃保存,熒光抗體對(duì)光敏感,操作時(shí)應(yīng)嚴(yán)格避光;
       
        3、IgG3的同型對(duì)照:保存于4℃避免凍存,反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體變性,形成多聚體;
       
        抗體保存其他信息:
       
        1、加入甘油:對(duì)于大多數(shù)抗體,可加入50%的甘油來(lái)避免反復(fù)凍融。甘油在-20℃可降低冰點(diǎn),但不建議加入甘油的抗體保存于-80℃,該溫度已經(jīng)超過(guò)了甘油的冰點(diǎn);
       
        2、加蛋白保護(hù)劑:蛋白在高濃度時(shí)不易降解,正如有些抗體會(huì)加入BSA作為穩(wěn)定劑的原因,同時(shí)加入蛋白也可減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來(lái)標(biāo)記的話(huà),則不能加入蛋白穩(wěn)定劑,因?yàn)檫@些穩(wěn)定劑會(huì)和抗體一起競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合標(biāo)記物。
       
        3、加入疊氮化Na:為了防止微生物污染,經(jīng)常選擇加入疊氮化Na到抗體中(終濃度 0.02% (w/v))。但在下述情況中不能使用疊氮化Na:
       
        1)、抗體用于染色或處理活細(xì)胞,用于體內(nèi)研究。疊氮化Na在抵抗微生物的同時(shí),對(duì)其它大部分有機(jī)物也是有毒的,因?yàn)樗钄嗔司€粒體的 細(xì)胞色素電子傳遞系統(tǒng)cytochrome electron transportsystem。
       
        2)、要偶聯(lián)帶有氨基的抗體。疊氮化Na會(huì)干擾任何含有氨基的偶聯(lián),因此在進(jìn)行偶聯(lián)之前,應(yīng)將疊氮化Na去除。偶聯(lián)后的抗體可以加入疊氮化Na保存,但是濃度只能是0.01%。對(duì)于需要偶聯(lián)的抗體,硫柳汞 (merthiolate)可以替代疊氮化Na作為保護(hù)劑。
       
        此外,如果需要去除疊氮化Na,可以通過(guò)凝膠電泳或過(guò)濾的方式(IgG 的分子量是 150kDa,疊氮化Na的分子量只有65Da),使用cut off 14kDa的濾膜即可將疊氮化Na從抗體中去除。
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