在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。

　　由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。ELISA試劑盒可用于測定抗原，也可用于測定抗體。

　　完整的elisa檢測試劑盒包含以下各組分：

　　（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；

　　（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；

　　（3）酶的底物；

　　（4）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測定

　　中）；

　　（5）結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；

　　（6）洗滌液；

　　（7）酶反應(yīng)終止液。

　　注意事項：

　　1、當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。

　　2、洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。

　　3、一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，使用排槍加樣。

　　4、請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。

　　5、如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。

　　6、在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時，請以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。

　　7、底物請避光保存。

　　8、不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。