ELISA試劑盒結(jié)果過低有可能的原因: A、檢查酶標儀紫外光波長是否設(shè)置正確,此亦可能導(dǎo)致結(jié)果偏離,但不影響相對濃度。
B、仔細檢查標準品是否稀釋正確,簡單的辦法是看zui低濃度的那個吸光度值是不是高于說明書的1.5倍,若高,可能有問題。
C、樣本蛋白含量高低直接影響所測濃度。
D、顯色時間過長可能導(dǎo)致OD值整體偏高以致zui高值>2.0,但此亦不影響相對濃度。
ELISA試劑盒出現(xiàn)隨機性的花板、跳孔現(xiàn)象原因:
1、樣品離心不*,反應(yīng)孔內(nèi)發(fā)生凝血或殘留細胞成分,應(yīng)充分離心,3000rpm6分鐘以上。
2、加樣時交叉污染,加標本時盡量避免交叉污染,如盛標本的試管周圍常有血痂,易脫落,應(yīng)遠離酶標板。
3、手工洗板造成的交叉污染,手工洗板時前3次注洗液后應(yīng)立即棄去,后幾次再設(shè)定浸泡時間,可減少交叉污染。
4、洗板機加液頭堵塞導(dǎo)致加液不滿或吸液殘留量較大,造成花板、跳孔,疏通加液頭,使洗板時每孔均注滿洗液,吸液時殘留量要小。
5、拍板時交叉污染,洗板完畢拍板時用合適的吸水紙巾,不要把無關(guān)物質(zhì)拍進板孔,并盡量不要在同位置拍,以免交叉污染。
使用時小細節(jié)不容忽視:
1)對于不一樣廠家酶標板留意調(diào)整吸液頭下降高度,防止沖刷針頭卡住酶標板。
2)需天天校正注液量及殘液量,洗刷后殘液量不得大于2μl。
3)及時更換破損吸液針,防止損壞底板包被。
4)關(guān)機前運用蒸餾水沖刷管道,防止洗液的結(jié)晶物阻塞管道。
5)留意調(diào)整洗液量,洗液量過多將溢出,過少將達不到洗刷作用。
6)不一樣種類試劑盒的洗液禁止混合運用。?