在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體外表的抗原或抗體起反響。用洗刷的辦法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分隔。再參加酶符號的抗原或抗體，也經過反響而結合在固相載體上。此刻固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈必定的份額。參加酶反響的底物后，底物被酶催化成為有色產品，產品的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量剖析。

　　ELISA試劑盒在確認收貨以后，不一定一次性就會用完，這就得需要把剩余的保存起來，關于它的保存，這幾點一定要注意...

　　一、要留意防止呈現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有類似過氧化物的活性，因而，在以HRP為符號酶的ELISA測定中，如血清標本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相，然后與后面參加的HRP底物反響顯色。

　　二、樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染，一則細菌的生長，其所分泌的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發生分解效果；二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應酶作符號的測定辦法發生非特異性攪擾。

　　三、血清標本如是以無菌操作別離，則能夠在2～8℃下保存一周，ELISA試劑盒如為有菌操作，則主張冰凍保存。樣本的保存，應在-70℃以下。

　　四、冰凍保存的血清標本須留意防止因停電等造成的重復凍融。標本的重復凍融所發生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發生破壞效果，然后引起假陰性成果。此外，凍融標本的混勻亦應留意，不要進行劇烈振蕩，重復顛倒混勻即可。

　　五、標本在保存中如呈現細菌污染所致的混濁或絮狀物時，ELISA試劑盒應離心沉淀后取上清檢測。