試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人心型脂肪酸結合蛋白（h-FABP）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結合蛋白（h-FABP）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

　　小鼠ELisa試劑盒的操作注意事項：

　　1、試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶*溶解后再使用。

　　2、實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

　　3、標準品稀釋液即可視為陰性對照或者空白；預處理后的樣本無需稀釋，直接取10μL加樣即可。

　　4、嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

　　5、所有液體組分使用前充分搖勻。