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      K599 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*50

      更新時間:2024-11-23

      簡要描述:

      K599 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*50是采用大腸桿菌經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA 的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108個轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA,-70℃保存3個月轉(zhuǎn)化效率可保持在90%以上。

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      K599 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*50以下是的訂購信息儲存條件:-70℃凍存
      操作方法:
      1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。
      2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預(yù)實驗確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
      3. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。
      K599 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*504. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
      注意事項
      1. 加入質(zhì)粒時體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個數(shù)量級。
      2. 混入質(zhì)粒時應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。
      K599 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*503. 平板上陽性克隆密度過大時,由于營養(yǎng)不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
      4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長,會降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計算轉(zhuǎn)化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
      5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。

       1,3-βD glucosidase 雞1,3-βD葡葡糖苷酶 規(guī)格: 48T/96T

       Aflatoxin 黃 規(guī)格: 48T/96T

       SJA 槐凝集素 規(guī)格: 48T/96T

       PNA 花生凝集素 規(guī)格: 48T/96T

       TRAIL-R3 猴子腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3 規(guī)格: 48T/96T

       AChRab 猴子乙酰受體抗體 規(guī)格: 48T/96T

       PF-4/CXCL4 猴子血小板因子4 規(guī)格: 48T/96T

       VEGFR-3 猴子血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3 規(guī)格: 48T/96T

       ADM 猴子腎上腺髓質(zhì)素 規(guī)格: 48T/96T

       GFAP 猴子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白 規(guī)格: 48T/96T

       HSP gp96 猴子熱休克蛋白糖蛋白96 規(guī)格: 48T/96T

       BNP 猴子腦鈉素/腦鈉尿肽 規(guī)格: 48T/96T

       ET-1 猴子內(nèi)皮素1 規(guī)格: 48T/96T

       ET 猴子內(nèi)毒素 規(guī)格: 48T/96T

       MIF 猴子巨噬細(xì)胞移動抑制因子 規(guī)格: 48T/96T

       MIP-1α/CCL3 猴子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α 規(guī)格: 48T/96T

       Collagenase I 猴子膠原酶I 規(guī)格: 48T/96T

       MMP11 猴子基質(zhì)金屬蛋白酶11 規(guī)格: 48T/96T

       FSH 猴子促卵泡素 規(guī)格: 48T/96T

       LTC4 猴子白三烯C4 規(guī)格: 48T/96T

       IL-2R 猴子白介素2受體 規(guī)格: 48T/96T

       IL-1 猴子白介素1 規(guī)格: 48T/96T

       α1-MG 猴子α1微球蛋白 規(guī)格: 48T/96T

       TNF-α 猴腫瘤壞死因子α 規(guī)格: 48T/96T

       apo-B100 猴載脂蛋白B100 規(guī)格: 48T/96T

       apo-A1 猴載脂蛋白A1 規(guī)格: 48T/96T

       INS 猴胰島素 規(guī)格: 48T/96T

       sVCAM-1 猴可溶性血管細(xì)胞粘附分子1 規(guī)格: 48T/96T

       sICAM-1 猴可溶性細(xì)胞間粘附分子1 規(guī)格: 48T/96T

      K599 電感受態(tài)細(xì)胞50ul*50 LMA 猴抗肝細(xì)胞膜抗體 規(guī)格: 48T/96T

       hs-CRP 猴超敏C反應(yīng)蛋白 規(guī)格: 48T/96T

       IFN-γ 猴γ 干擾素 規(guī)格: 48T/96T

       IFN-α 猴α干擾素 規(guī)格: 48T/96T

       E-Selectin/CD62E 猴E選擇素 規(guī)格: 48T/96T

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