ATCC15834 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10?

ATCC15834 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10? 操作方法（以下操作均按無(wú)菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行）
1 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中，如需分裝可將剛?cè)诨?xì)胞懸液分裝到無(wú)菌預(yù)冷的離心管中，置于冰浴中。
●  一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100 μl，可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。應(yīng)注意所用DNA 體積不要超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一。
以下實(shí)驗(yàn)以100 μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
ATCC15834 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10? 2 向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（100 μl 的感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng 超螺旋質(zhì)粒DNA 所飽和），輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物，在冰浴中靜置30 分鐘。
3 將離心管置于42℃水浴中放置60-90 秒，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中，使細(xì)胞冷卻2-3 分鐘，該過(guò)程不要搖動(dòng)離心管。
4 向每個(gè)離心管中加入900 μl 無(wú)菌的SOC 或LB 培養(yǎng)基（不含抗生素）， 混勻后置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)1 小時(shí)（160-220 轉(zhuǎn)/分鐘），目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá)，使菌體復(fù)蘇。
5 將離心管內(nèi)容物混勻，吸取100 μl 已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加到含相應(yīng)抗生素的SOB 或LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的彎頭玻棒輕輕的將細(xì)胞均勻涂開(kāi)。將平板置于室溫直至液體被吸收，倒置平板，37℃培養(yǎng)12-16 小時(shí)。
●  涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來(lái)調(diào)整。如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較多，可取更少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；反之，如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較少，可取200-300 μl 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。如果預(yù)計(jì)的克隆較少，可通過(guò)離心（4,000 rpm, 2分鐘）后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于一個(gè)平板中。（涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過(guò)少可以將剩下的菌液再涂布新的培養(yǎng)板）
ATCC15834 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10?  注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在 -70℃，不可多次凍融和放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，以避免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2. 進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時(shí)，應(yīng)根據(jù)相應(yīng)溫度及無(wú)菌條件的要求進(jìn)行。
3 為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功，可以保留部分連接反應(yīng)液，以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到低。
以下是的相關(guān)產(chǎn)品：

 MN 人變腎上腺素 規(guī)格： 48T/96T

 flagellin 人鞭毛蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 PY 人吡啶交聯(lián)物 規(guī)格： 48T/96T

 PYD 人吡啶酚 規(guī)格： 48T/96T

 NPC 人鼻咽癌 規(guī)格： 48T/96T

 NP 人/苯丙酸去 規(guī)格： 48T/96T

 LPA 人苯 規(guī)格： 48T/96T

 BJP 人本周蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 cPLA2 人胞漿型磷脂酶A2 規(guī)格： 48T/96T

 CIg 人胞漿免疫球蛋白 規(guī)格： 48T/96T

人包蟲(chóng)抗體IgG ELISA Kit，48T/96T 人包蟲(chóng)抗體IgG ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 BTA 人膀胱腫瘤抗原 規(guī)格： 48T/96T

 UBC 人膀胱癌抗原 規(guī)格： 48T/96T

 CPN10 人伴侶蛋白10 規(guī)格： 48T/96T

 Cys-C 人半蛋白酶抑制劑/胱抑素C 規(guī)格： 48T/96T

 CP 人瘢痕性天皰瘡抗體 規(guī)格： 48T/96T

 PT 人百日咳毒素 規(guī)格： 48T/96T

 LIFR 人白血病抑制因子受體 規(guī)格： 48T/96T

 ALCAM 人白細(xì)胞活化黏附因子 規(guī)格： 48T/96T

 LCA/CD45 人白細(xì)胞共同抗原 規(guī)格： 48T/96T

 CD4 人白細(xì)胞分化抗原4 規(guī)格： 48T/96T

 CD30 人白細(xì)胞分化抗原30 規(guī)格： 48T/96T

 LR 人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素 規(guī)格： 48T/96T

 SLPI 人白細(xì)胞蛋白酶抑制因子 規(guī)格： 48T/96T

 HLE 人白細(xì)胞彈性蛋白酶 規(guī)格： 48T/96T

 C.albicans 人白色念珠菌 規(guī)格： 48T/96T

 LTE4 人白三烯E4 規(guī)格： 48T/96T

 LTD4 人白三烯D4 規(guī)格： 48T/96T

 LTC4 人白三烯C4 規(guī)格： 48T/96T

 LTB4 人白三烯B4 規(guī)格： 48T/96T

 IRAK 人白介素受體相關(guān)激酶 規(guī)格： 48T/96T

 IL-5 人白介素-5 規(guī)格： 48T/96T

 IL-4 人白介素4 規(guī)格： 48T/96T

 IL-3 人白介素3 規(guī)格： 48T/96T

 IL-2R 人白介素2受體 規(guī)格： 48T/96T

 IL-2sRβ  人白介素2可溶性受體β鏈 規(guī)格： 48T/96T

 IL-2sRα 人白介素2可溶性受體α鏈 規(guī)格： 48T/96T

ATCC15834 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10?  IL-27 人白介素27 規(guī)格： 48T/96T

 IL-23 人白介素23 規(guī)格： 48T/96T

 IL-2 人白介素2 規(guī)格： 48T/96T

 IL1Ra 人白介素1受體拮抗劑 規(guī)格： 48T/96T