AH109 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10

AH109 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10 操作方法（以下操作均按無(wú)菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行）
1 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中，如需分裝可將剛?cè)诨?xì)胞懸液分裝到無(wú)菌預(yù)冷的離心管中，置于冰浴中。
●  一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100 μl，可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。應(yīng)注意所用DNA 體積不要超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一。
以下實(shí)驗(yàn)以100 μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
AH109 感受態(tài)細(xì)胞100ul*102 向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（100 μl 的感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng 超螺旋質(zhì)粒DNA 所飽和），輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物，在冰浴中靜置30 分鐘。
3 將離心管置于42℃水浴中放置60-90 秒，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中，使細(xì)胞冷卻2-3 分鐘，該過(guò)程不要搖動(dòng)離心管。
4 向每個(gè)離心管中加入900 μl 無(wú)菌的SOC 或LB 培養(yǎng)基（不含抗生素）， 混勻后置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)1 小時(shí)（160-220 轉(zhuǎn)/分鐘），目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá)，使菌體復(fù)蘇。
AH109 感受態(tài)細(xì)胞100ul*105 將離心管內(nèi)容物混勻，吸取100 μl 已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加到含相應(yīng)抗生素的SOB 或LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的彎頭玻棒輕輕的將細(xì)胞均勻涂開。將平板置于室溫直至液體被吸收，倒置平板，37℃培養(yǎng)12-16 小時(shí)。
●  涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來(lái)調(diào)整。如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較多，可取更少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；反之，如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較少，可取200-300 μl 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。如果預(yù)計(jì)的克隆較少，可通過(guò)離心（4,000 rpm, 2分鐘）后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于一個(gè)平板中。（涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過(guò)少可以將剩下的菌液再涂布新的培養(yǎng)板）
 注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在 -70℃，不可多次凍融和放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，以避免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2. 進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時(shí)，應(yīng)根據(jù)相應(yīng)溫度及無(wú)菌條件的要求進(jìn)行。
3 為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功，可以保留部分連接反應(yīng)液，以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到低。
以下是的相關(guān)產(chǎn)品：

 MGP 人基質(zhì)γ羧基蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 lumican 人基膜聚糖 規(guī)格： 48T/96T

 MSTN 人肌抑素 規(guī)格： 48T/96T

 dystrophin 人肌養(yǎng)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 MYOG 人肌細(xì)胞生成素 規(guī)格： 48T/96T

 CK-MB 人肌酸激酶同工酶MB 規(guī)格： 48T/96T

 CK-MB 人肌酸激酶同工酶MB 規(guī)格： 48T/96T

 CK 人肌酸激酶 規(guī)格： 48T/96T

 MHC 人肌球蛋白重鏈 規(guī)格： 48T/96T

 MLCK 人肌球蛋白輕鏈激酶 規(guī)格： 48T/96T

 MLC 人肌球蛋白輕鏈 規(guī)格： 48T/96T

 Myosin 人肌球蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 TN-R 人肌腱蛋白R(shí) 規(guī)格： 48T/96T

 TN-R 人肌腱蛋白R(shí) 規(guī)格： 48T/96T

 MYO/MB 人肌紅蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 MYO/MB 人肌紅蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 Tn-Ⅰ 人肌鈣蛋白Ⅰ 規(guī)格： 48T/96T

 FⅫa 人活化Ⅻ 規(guī)格： 48T/96T

 APCR 人活化蛋白C抵抗素 規(guī)格： 48T/96T

 APC 人活化蛋白C 規(guī)格： 48T/96T

 LHRH 人黃體生成素釋放激素 規(guī)格： 48T/96T

 cAMP 人 規(guī)格： 48T/96T

 cGMP 人環(huán)磷酸鳥苷 規(guī)格： 48T/96T

 COX-2 人環(huán)加氧酶2 規(guī)格： 48T/96T

 CsA 人A 規(guī)格： 48T/96T

 talin 人踝蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 ALOX-5 人花生四烯酸5脂加氧酶 規(guī)格： 48T/96T

 AA 人花生四烯酸 規(guī)格： 48T/96T

 EPOR 人紅細(xì)胞生成素受體 規(guī)格： 48T/96T

 EPO 人紅細(xì)胞生成素 規(guī)格： 48T/96T

 EMP 人紅細(xì)胞膜蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 ESF 人紅細(xì)胞刺激因子 規(guī)格： 48T/96T

 sm Actinin-α  人橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α  規(guī)格： 48T/96T

 MLZE 人黑素瘤衍生拉鏈額外核因子 規(guī)格： 48T/96T

 MC Ab 人黑色素細(xì)胞抗體 規(guī)格： 48T/96T

 MSH 人黑色素細(xì)胞刺激素 規(guī)格： 48T/96T

 MMSAM 人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子 規(guī)格： 48T/96T

 AH109 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10MAGE 人黑色素瘤相關(guān)抗原 規(guī)格： 48T/96T

 MAGE 人黑色素瘤相關(guān)抗原 規(guī)格： 48T/96T

 MART/Melan-A 人黑色素瘤標(biāo)記物 規(guī)格： 48T/96T

 NF-κB p65 人核因子-κB亞基p65親和肽 規(guī)格： 48T/96T