BAR基因核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）

產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：BAR基因核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
規(guī)格：48T  0.1PCR管
編號(hào)：BH-P97057
分類：PCR-熒光探針法
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
CM-R042大鼠直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL肯特肽抗體Anti-Kentsin>95%,BR

SGC7901細(xì)胞，低分化胃癌細(xì)胞 轉(zhuǎn)染了tk基因的SW038-C2細(xì)胞,SW038-C2-tk細(xì)胞 長尾綠猴腎細(xì)胞;4647心房利鈉肽（1-28）,大鼠Atrial Natriuretic Peptide (1-28),rat>95%,BR

COS-1(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2心房利鈉肽（126-149）Atrial Natriuretic Peptide (126-149) (rat)>95%,BR

CCL1 Others Human  CCL1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 心房利鈉肽（126-150），大鼠Atrial Natriuretic Peptide (126-150) (rat)>95%,BR

腎癌Wilms細(xì)胞;G401心鈉素Ⅰ，大鼠Atriopeptin I (rat)>95%,BR
EPHA2 Others Human  EphA2 (aa 585-976) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸美利曲辛（）含量測定Melitracen

JEC, 內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系咪唑斯汀（）HPLC法含量測定Mizolastine

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 小鼠胰腺癌beta細(xì)胞，Beta-TC-6細(xì)胞 EB (NBL-4)(牛胚氣管細(xì)胞)地（）UV法含量測定Desloratadine

紅系白血病細(xì)胞;TF-1糠酸莫米（）鑒別Mometasone Furoate

HAVCR1 Others Canine 狗 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 甲鈷胺>98%,BRMecobalamin
BAR基因核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）RT4膀胱移行細(xì)胞瘤細(xì)胞 RT4 human ansitional cell bladder papillary tumor cells McCOY's 5+10%FBS鳥苷-5'-二嶙酸二鈉鹽，英文名或英文縮寫：5'-GDP，2Na，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：2500u

FGF6 Protein Human 重組 FGF6 / FGF-6 蛋白本全 Bqnzcldqhydq (List ChqMiccl);Bqnzoyl hydridq;Bqnzqnq ccroncl 100-2-7

B16-F10(小鼠皮膚色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞HM反式-3-吲哚酸，英文名或英文縮寫：IAA，級(jí)別：超，98%，規(guī)格：5KU

肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞總RNAHPAF NA層析氧化鋁，英文名或英文縮寫：Alumina，級(jí)別：BR，97%，規(guī)格：1克

CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-Acetyl-D-Glucosamine 1g/5g/25g原裝 Sigma A8625