普氏立克次體核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）

產品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

訂購信息：
 產品名稱：普氏立克次體核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規格：50T
編號：BH-P96619
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

準備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
小鼠肥大細胞瘤細胞;P8151酸Oseltamivir phosphate >98%

KB細胞，口腔表皮樣癌細胞 食管癌細胞,KYSE510細胞 家貓腎細胞;CATK11酸()Oseltamivir phosphate >98%,

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5鹽酸地布卡因Dibucaine HCl>98%,USP,BR

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) 多奈哌齊Donepezil >98%

視網膜星形膠質細胞HRA()Doripenem >99%,,一水合物
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸鹽(≥98.0%)≥98.0%2,4,5,6-Tetraaminopyrimidine sulfate salt

主動脈平滑肌細胞裂解物HASMCL甲酯(99%)0.99Methyl nicotinate

SK-HEP-1細胞，肝癌細胞 低轉移肺癌細胞,95-C細胞 腦動脈血管內皮細胞Many types of cells　5 × 105方(1ml)N-甲基-N-(基硅基)乙酰胺(97%)0.97N-Methyl-N-(trimethylsilyl)acetamide

兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-1苔酚一水合物(98%)0.98Orcinol monohydrate

TIMP1 Others Human  TIMP-1 / TIMP1 細胞裂解液 (陽性對照) 2,2’-脫水尿苷；環尿苷>99%,BR2,2'-O-Cyclouridine
普氏立克次體核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）前脂肪細胞-內臟RNAHPA-v miRNA5 μg，英文名或英文縮寫：Lead，級別：AR，52.5%，規格：25克

兔主動脈平滑肌細胞;SMC 白血病細胞，L1210細胞 SH2細胞，小鼠B細胞雜交瘤細胞β.β氧二炳晴 2-Cycnoqthyl qtqr 1626-48-0

胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA4-硝基本，英文名或英文縮寫：4-nitnoaniline，級別：BS，規格：25克

HA Others H16N3 甲型流感 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) 二本基乙炔，英文名或英文縮寫：Dipxenylacetylene，級別：CP，規格：5克

少突膠質前體細胞總RNAHOPC NA616-47-71-甲基咪唑;N-甲基咪唑;1-甲基甘噁啉1-metxyliMidazole;1-metxylglyoxaline