星狀病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）

產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：星狀病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規(guī)格：50T
編號：BH-P97248
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

準備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
胚胎心臟成纖維樣細胞;HEH2赫斯特熒光燃料33258bisBenzimide H 33258 >98%,進分

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) 赫斯特熒光燃料33342bisBenzimide H 33342 tri>98%,進分

HCC-9204 肝癌Fluo-3 AM;鈣熒光探針Fluo 3-AM >90%,進口

293 [HEK-293]胚腎細胞 293 human embryonic kidney cell line [HEK-293] DMEM+10% FBSIndo 1-AM;鈣熒光探針Indo 1-AM>95%,進口

TNF Protein Rat 重組大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白Fluo 4-AM;鈣熒光探針Fluo 4-AM>95%,進口
CL-0330COLO 320DM(結(jié)直腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2L-高鹽酸鹽>98%,BRL-Homoarginine 

CLK3 Others Human  CLK3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) TPCK(進分)>97%,進分,Sigma T4376TPCK

外根殼細胞總RNAHHORSC NATPCK>97%,BRTPCK

CNE細胞，鼻咽癌細胞 胚肺成纖維細胞,HFL-I細胞 原代骨骼肌細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells　500/100mlL-苯甲酯鹽酸鹽0.98(s)-2-phenylglycine methyl ester

豹貓肺成纖維樣細胞;LCL3D-乙酯鹽酸鹽>98.5%,BRH-D-Ala-OEt·HCl
星狀病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）ILKAP Others Human  ILKAP 細胞裂解液 (陽性對照) 2,4,4'-三羥基二苯甲酮(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)2,4,4'-Trihydroxybenzophenone

P388D1 小鼠樣瘤細胞2,3',4,4'-四羥基二苯甲酮(>90.0%(GC)(T))>90.0%(GC)(T)2,3',4,4'-Tetrahydroxybenzophenone

小鼠神經(jīng)干細胞(EGFP標記)1,4-雙(4-氨苯氧基)苯(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)1,4-Bis(4-aminophenoxy)benzene

小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)1,3-雙(4-羥基苯氧基)苯(>97.0%(GC))>97.0%(GC)1,3-Bis(4-hydroxyphenoxy)benzene

正常前列腺上皮細胞;RWPE-1 食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL2-(羥甲基)-12-冠4-(>95.0%(GC))>95.0%(GC)2-(Hydroxymethyl)-12-crown 4-Ether