化膿放線菌PCR檢測試劑盒說明書

化膿放線菌PCR檢測試劑盒說明書組成及試劑配制:
1、 酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 化膿放線菌PCR檢測試劑盒說明書樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運輸：
1、化膿放線菌PCR檢測試劑盒說明書樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可保存，但應避免反復凍融（zui多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。

特點優勢：
    1.特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
    2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
    5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

    6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

CCDC83 卷曲螺旋結構域蛋白83抗體

CRMP5 二氫嘧啶酶相關蛋白5抗體

Phospho-CRMP2 (Thr514+Ser518) 磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體

CRMP4 腦衰蛋白反應調節蛋白4抗體

CCDC87 卷曲螺旋結構域蛋白87抗體

CCDC92 卷曲螺旋結構域蛋白92抗體

CHCHD8 卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD8抗體

CCDC88B 大腦拉鏈結構域蛋白抗體

CCDC93 卷曲螺旋結構域蛋白93抗體

CCDC96 卷曲螺旋結構域蛋白96抗體

CHCHD5 卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD5抗體

CHCHD6 卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD6抗體

CHCHD6 卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD6抗體

CEND1 細胞周期通道和神經細胞分化蛋白1抗體

COLEC10(liver) 凝集蛋白家族10抗體（肝）

COMMD7 銅代謝結構域蛋白7抗體

COMMD4 COMM結構域蛋白4抗體

COBLL1 Cordon bleu蛋白樣1抗體

COLEC11 凝集蛋白家族11抗體

COMMD1 銅代謝結構域蛋白1抗體

C20orf96 20號染色體開放閱讀框96抗體

C3orf26 3號染色體開放閱讀框26抗體

CADM2 細胞粘附分子2抗體

COBL 耳聾-甲狀腺腫綜合征相關COBL蛋白抗體

化膿放線菌PCR檢測試劑盒說明書C20orf195 20號染色體開放閱讀框195抗體

C7orf62 7號染色體開放閱讀框62抗體

C9orf174 9號染色體開放閱讀框174抗體

C6orf64 6號染色體開放閱讀框64抗體