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      鞭毛蛋白(flagellin)ELISA Kit

      更新時間:2024-12-02

      簡要描述:

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      公司采用全是進口原材料研,發靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。
      產品名稱:鞭毛蛋白(flagellin)ELISA Kit
      英文名稱:Human flagellin (flagellin) ELISA Kit
      規格 48T/96T
      主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
      試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
      檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..

      試劑盒組成及試劑配制 :
      1.
      酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
      2.
      標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
      3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
      4. 標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
      5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
      6. 標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1100
      7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1100
      8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
      9.
      濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
      10.
      終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
      標本的采集與保存:
      1、血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
      可,或將上清置于-20oC -80oC 保存,但應避免反復凍融。
      2、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30 分鐘內于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
      取上清即可檢測,或將上清置于-20oC -80oC 保存,但應避免反復凍融。
      3、組織勻漿:
      1 取適量組織塊,于預冷PBS0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
      2 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預冷PBS 進行充分研磨,該過程需在冰上進行(有條件實驗室可選用機器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復凍融法可重復2 次)。
      3 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測。
      4、其它生物標本:請1000×g 離心20 分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20oC -80oC 保存,但應避免反復凍融。
      操作步驟:
      1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
      2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
      3. 溫育:用封板膜封板后置 37溫育 30 分鐘。
      4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
      5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。
      6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
      7. 溫育:操作同 3
      8. 洗滌:操作同 5
      9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色15 分鐘.
      10.
      終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
      11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。
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