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      脆弱擬桿菌PCR檢測試劑盒說明書

      更新時間:2024-12-02

      簡要描述:

      脆弱擬桿菌PCR檢測試劑盒說明書是即用型PCR試劑盒的改良產品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應,具有廣泛的用途。

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      脆弱擬桿菌PCR檢測試劑盒說明書組成及試劑配制:
      1、 酶標板:一塊(96孔)
      2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
      脆弱擬桿菌PCR檢測試劑盒說明書3、 樣品稀釋液:1×20ml。
      4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
      5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

      樣本采集、存放及運輸:
      1、脆弱擬桿菌PCR檢測試劑盒說明書樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
      2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
      3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。

      特點優勢:
          1.特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
          2.   重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
          3.   靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
          4.   實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
          5.   優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

          6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。

      反應五要素:
      參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
      引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
      ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
      ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
      ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
      ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
      ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
      ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
      ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
      引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

      ACAA1 乙酰?;D移酶1抗體

      phospho-beta Actin (Tyr53) 磷酸化β-肌動蛋白抗體

      phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser346) 磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR 抗體

      phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser355 + Ser356) 磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體

      APOD 載脂蛋白D抗體

      ASIC1/BNaC2/ASIC1A 酸敏感離子通道1抗體

      ADAR1 (C-terminus) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(C端)

      AF10 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體

      ADCY1 腺苷酸環化酶1抗體

      APC 腺瘤樣息肉抗體

      AGPAT1 溶血磷脂酰基轉移酶抗體

      ANKS3 錨蛋白重復及SAM結構域蛋白3抗體

      phospho-ALK (Tyr1586) 磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體

      ACADVL ?;摎涿负荛L鏈抗體

      AMSH 信號轉導銜接結合蛋白抗體

      ASB3 錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體

      Aurora C 有絲分裂激酶B抗體

      Phospho-Ack1 (Tyr284) 磷酸化Ack1抗體

      Phospho-Ack1 (Tyr326) 磷酸化Ack1抗體

      Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412) 磷酸化β抑制蛋白1抗體

      Phospho-Aurora A (Thr288) 磷酸化有絲分裂激酶A抗體

      phospho-APS(Ser598) 磷酸化APS抗體

      Aurora A 有絲分裂激酶A抗體

      AIM2 干擾素誘導蛋白AIM2抗體

      Aquaporine 2 水通道蛋白-2抗體

      ABI2 腫瘤抑制基因ABI2/蛋白激酶結合蛋白抗體

      脆弱擬桿菌PCR檢測試劑盒說明書ARL11 ADP核糖基化因子樣11抗體

      ARMCX3 ARM重復X連鎖蛋白ARMCX3抗體

      ARMCX1 ARM重復X連鎖蛋白ARMCX1抗體

      ARMCX2 ARM重復X連鎖蛋白ARMCX2抗體

      Apg10 自噬相關蛋白10抗體

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