查帕雷病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）

訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：查帕雷病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規(guī)格：50T
編號：BH-P96485
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

準備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設(shè)置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

整合SV40基因的上皮細胞;HBL-100 [HBL100]鈮標(biāo)準溶液(1000μg/ml)Niobium standard1000μg/ml

DNASE1 Others Human  DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 細胞裂解液 (陽性對照) 鎳標(biāo)準溶液(100μg/mL，基體:1%HNO3)Nickel Standard100μg/mL，基體:1%HNO3

CL-0384MDA-MB-468-06(癌細胞)5×106cells/瓶×2鉀標(biāo)準溶液(500mg/L,溶劑：水)Potassium standard500mg/L,溶劑：水

Mv1Lu細胞，貂肺上皮細胞 紅白細胞白血病細胞,HEL細胞 皮膚成纖維細胞;HSAS4鉀標(biāo)準溶液(1000µg/mL,基體:1%HCl) Potassium Solution1000µg/mL,基體:1%HCl

鯉魚尾鰭細胞;YZ16鐠標(biāo)準溶液(1000μg/ml)Praseodymium standard1000μg/ml
LAYN Others Human  Layilin 細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸鈣(>99%,BR)>99%,BRCalcium sulfate, anhydrous

CM-H084臍靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL二環(huán)己基碳二亞胺(>99%,BR)>99%,BRDCC, Dicyclohexylcarbodiimide

SERPINI1 Others Mouse 小鼠 SerpinI1 / Neuroserpin 細胞裂解液 (陽性對照) 丁二酸二甲酯(>99%,BR)>99%,BRDimethyl succinate

小鼠角膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL二甲基甲酮鈉鹽(>97%,BR)>97%,BRDimethylglyoxime  salt

L6565小鼠白血病克隆細胞系 L6565 murine leukemia cell line RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS直接藍71(≥50%,BR)≥50%,BRDirect blue 71
查帕雷病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）軟骨細胞Many types of cells　5 × 105方(1ml)N-苯甲酰-2'-脫氧胞苷>98%,BRbz-dC

MAP3K8 Others Human  TPL2 / MAP3K8 / MEKK8 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N6-苯甲酰-2'-脫氧腺苷>98%,BRbz-dA

KM小鼠子瘤株;U145'-O-三苯甲基尿苷>97%,BRTrt-rU

NIH/3T3細胞，胚胎成纖維細胞 高轉(zhuǎn)移肝癌細胞,LM3細胞 CL-0104HEp-2(喉表皮樣癌細胞)5×106cells/瓶×2Trt-dU>98%,BRTrt-dU

敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21N2-洛沙坦-洛沙坦(洛沙坦雜質(zhì))美國進口N2-Losartanyl-losartan (Losartan Impurity)