普馬拉病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）

產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：普馬拉病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規(guī)格：50T
編號：BH-P96482
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

準備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設(shè)置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
正常大鼠腎細胞;NRK硫代腺嘌呤二核苷酸1酸鈉鹽Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate  salt美國進口

Panc 10.05細胞，胰腺腺癌細胞 舌鱗癌細胞系,TSCCA細胞 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞;C6腺嘌呤二核苷1酸鈉鹽Nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate  salt美國進口

JeKo-1(套細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2腺嘌呤二核苷酸鈉鹽Nicotinic acid adenine dinucleotide  salt美國進口

Promocell C-25020 Hepatocyte Maienance Medium, 肝細胞維持培養(yǎng)液 500mlα-腺嘌呤二核苷酸α-Nicotinamide adenine dinucleotide美國進口

胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]NAD+, 鋰鹽NAD+, Lithium Salt美國進口
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Brisbane/60/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) 苯甲酰基十字孢堿(PKC-412)≥96%,美國進口Midostaurin

A431 表皮癌細胞無水鄰菲啰啉；1,10-菲羅啉AR,>99%1,10 –Phenanthroline anhydrous

PLC/PRF/5肝癌亞力山大細胞 PLC/PRF/5 human hepatoma cell Alexander MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS鄰菲啰啉一水；1,10-菲羅啉一水AR,>99%1,10-Phenanthroline hydrate

RSPO3 Protein Human 重組 RSPO3 / R-spondin 3 蛋白 (aa 1-146, His 標簽)鄰菲啰啉鹽酸鹽一水；1,10-菲羅啉鹽酸鹽AR,>99%1,10-Phenanthroline   monohydrate

骨骼肌細胞 (HSkMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 Mouse酮色林,凱他色林()HPLC>98%,Ketanserin
普馬拉病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）RLF, 大鼠成纖維細胞 STJ.EPI.H7細胞 COS-1(SV40 轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞)S-(+)-2-基-4-甲基-1-，英文名或英文縮寫：L-Leucinol，級別：BR，98%，規(guī)格：5克

結(jié)直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]3，5-二基異坐，97% 3,5-Dimqthylisoxczolq 300-87-8

REG1A Others Human  REG1A / PSPS 細胞裂解液 (陽性對照) PHOSPHATEBUFFEREDSALINE(PBS)20XCONCENTRATE,pH7.5PBS溶液超級透明無混濁液體RTsigma

腦微血管內(nèi)皮細胞總RNAHBMEC NA脲酶，英文名或英文縮寫：Urease(jack bean)，級別：BR，RZ～3,≥250u/mg，規(guī)格：25克

KYNU Others Mouse 小鼠 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) -基本酚2-Aminopxenol