公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

二、細胞培養操作

1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

    a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。        

     c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。

     b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養注意事項 

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象 發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養基重懸 細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培 養條件新配制的培養基來培養細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產品：

Phospho-MEK6 (Ser207)： 0酸化原活化蛋白激酶MKK6抗體 豚鼠心肌細胞;GP-H1

IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Ierleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標簽) 大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒 IGFBP-6(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6)  小鼠結合蛋白6 96T

MDC： 嗜酸粒細胞趨化蛋白22抗體 CAT Others Human 人 CAT / Catalase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠角膜上皮細胞培養基 100mL 大鼠心肌肌鈣蛋白T(TN2)ELISA試劑盒 CSF(Human colony-stimulating factor)  人集落刺激因子 96T

Met Enkephalin： 甲硫酸腦啡肽抗體 A-673細胞，橫紋肌瘤細胞 Hela細胞耐藥亞株,Hela/DDP細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1

MADB106(大鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) 人非小細胞肺癌抗原(LTA)ELISA 試劑盒 phospho-FAK(pSer732)(phospho-Focal adhesion kinase) 0酸化粘著斑激酶抗原 0.5mg

phospho-HP1 alpha (Tyr24)： 0酸化異染色質蛋白1抗體 卵巢上皮細胞生長添加物OEpiCGS

CCL18 Protein Human 重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 (His 標簽) 人非神經元性烯醇化酶(NNE)ELISA 試劑盒 FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase) Fas活化的絲/蘇酸激酶抗原 0.5mg

Phospho-HP1(Tyr43)： 異染色質蛋白10酸化抗體 IL13 Others Human 人 IL13 / ALRH CHO細胞裂解液 (陽性對照)

人前列腺平滑肌細胞培養基 100mL 人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA 試劑盒 FBN1 (fibrillin 1) 原纖維蛋白1抗原 0.5mg

HOS人骨肉瘤細胞PSA(Pa3)： 人前列腺特異性抗原單克隆抗體 主動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

GRN Protein Mouse 重組小鼠 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 標簽) 大鼠泛素結合酶(E2/UBCE)ELISA試劑盒 NE-B(Human Noradrenaline Bitartas)  人重去甲 96T

PSA (PA5)： 鼠抗人前列腺特異性抗原單克隆抗體 FAM171B Others Human 人 FAM171B / KIAA1946 人細胞裂解液 (陽性對照)

MSTO-211H 人肺癌細胞株 大鼠泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA試劑盒 Cav-1  大鼠窖蛋白Caveolin1 96T

Prohibitin： 抑制素/抑制因子抗體 293001A細胞，Sars蛋白表達株 人癌細胞,MDA-MB-436細胞 雪旺細胞培養基SCM-prf