RNAlong RNA 長期保存液

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

商品屬性

保存條件：4℃。
產(chǎn)品介紹：
RNA性質(zhì)不穩(wěn)定，極易降解。溶解于無RNase的TE 或水中的純化RNA，即便是儲存于-20 oC也難免降解。為解決這一問題，可以將RNA沉淀或RNA溶液溶解于RNA 長期保存液中，允許RNA 4oC保存或-20oC至少保存1年而免于降解。RNA長期保存液是RNA樣品運輸和中長期保存的佳選擇。需要時可用常規(guī)乙醇法沉淀回收RNA，或直接吸取儲存于RNA 溶解保護(hù)液中的高濃度RNA(可達(dá)4 mg/ml)進(jìn)行RNA 電泳、Northern Blot。
注意事項：
1. RNA 長期保存液可能抑制逆轉(zhuǎn)錄酶活性，做 RT-PCR 反應(yīng)前應(yīng)該用乙醇沉淀 RNA。
2. 在 RNA 長期保存液中的 RNA 的終濃度不應(yīng)該超過 4μg /μl。用 RNA 長期保存液溶解 RNA 沉淀：
1. 對固體 RNA 沉淀，每 0.4-4μg RNA 沉淀加入 1μl RNA 長期保存液，反復(fù)吹打混勻或者室溫振蕩 15-30 min 溶解沉淀。干燥的 RNA 沉淀難以溶解，可反復(fù)吹打混勻后 50oC 加熱 10-15 min。先用小體積無 RNase 的TE 或水溶解 RNA 沉淀，然后按液態(tài) RNA 操作。
2. 對液態(tài) RNA 溶液，每 0.4-4μg RNA 溶液加入 1μl RNA 長期保存液，混勻。注意混合液中 RNA 長期保存液的體積百分比不低于 80%。
3. 測定 OD 值。注意加入相應(yīng)量的 RNA 長期保存液做空白。
4. 將溶解的 RNA 樣品儲存于-20 oC 或者-70 oC。從 RNA 長期保存液中沉淀 RNA：
1. 估計 RNA 溶液終體積。加入 4 倍體積的無水乙醇，混勻。如果溶液體積過小，可加入 RNase free water 稀釋 RNA 溶液,如果溶液中 RNA 含量低于 0.25μg /μl，可加入 5M NaCl(RNase free) 至終濃度 0.2M,混勻后再加入 4 倍體積乙醇。
2. 室溫放置 5 min。
3. 12,000rpm 離心 5 min,棄上清,風(fēng)干，溶解。
4. 重新沉淀的 RNA 溶解后可用于 RT-PCR 反應(yīng)。也可用于任何其他實驗。直接使用 RNA 長期保存液中的 RNA：直接吸取 RNA 長期保存液中的 RNA，進(jìn)行普通或甲醛變性電泳和 Northern Blot。進(jìn)行甲醛變性電泳時，最后上樣的樣品中的 RNA 長期保存液的濃度可高達(dá) 50%。
附：甲醛變性電泳樣品準(zhǔn)備： 臨用前，混合水（87μl），甲醛（81μl），50%甘油/含 0.25 mg/ml 溴芬蘭(48μl ) 和20X MOPS (24μl). 將上述混合液和 RNA 長期保存液中的 RNA 樣品等體積混合，55 oC 溫育 10 min，按照標(biāo)準(zhǔn)的甲醛變性電泳過程上樣。

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