A375人惡性黑色素瘤細(xì)胞

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

一、商品介紹：

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細(xì)胞計數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

三、培養(yǎng)注意事項

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人真皮成纖維母細(xì)胞-胎兒HDF-f 大鼠腫瘤壞死因子α(TNFα)ELISA試劑盒 Insulin Protein/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記豬胰島素蛋白 0.1ml

LAMR1(CT)： 層粘連蛋白受體1抗體 小鼠血細(xì)胞;WEHI-3 [WEHI3]

Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人淋巴成纖維細(xì)胞HLF 大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒 Mouse IgG (免疫親和化) 小鼠IgG 1mg

LAMR1： 層粘連蛋白受體1抗體 CL-0041BT-549(人管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

FGF14 Protein Human 重組人 FGF14 / SCA27 蛋白 (isoform 1B) 大鼠腫瘤壞死因子(配體)超家族成員14(TNFSF14)ELISA試劑盒 Mouse IgM 小鼠IgM (免疫親和化) 1mg

Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256 人可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA 試劑盒 ADRA2 peptide 能受體2抗原 0.5mg

SCHAD： 短鏈L-3羥烷基脫氫酶抗體 人胚胎，皮膚，肌肉;M-7

Daudi(人淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0206SGC7901(人胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO 人可溶性白細(xì)胞分化抗原28(sCD28)ELISA 試劑盒 CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子 0.5mg

HDAC9： 組蛋白去乙酰化酶9抗體 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T

PC-3M-IE8(人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株) 5×106cells/瓶×2 人可溶性白細(xì)胞分化抗原21(CR2/sCD21)ELISA 試劑盒 CT (Calcitonin ) 降鈣素(抗原) 0.5mg

A375人惡性黑色素瘤細(xì)胞PCDHA2： 原鈣粘附蛋白α2抗體 CHRF細(xì)胞，人巨核細(xì)胞白血病 人肺癌細(xì)胞系(未分化),Calu-6細(xì)胞 5637, 人膀胱癌細(xì)胞

TSLP Others Mouse 小鼠 TSLP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒 VB6  大鼠維生素B6 96T

PAX4： 配對盒同源基因4抗體 CL-0354HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

LS 174T人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 LS 174T human colon adenocarcinoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS 大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒 aGT(Mouse angiotensinogen) 小鼠血管緊張素原 96T

PR3： 白細(xì)胞蛋白酶3抗體 HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)