Y187 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10

 Y187 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10操作方法（以下操作均按無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行）
1 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中，如需分裝可將剛?cè)诨?xì)胞懸液分裝到無菌預(yù)冷的離心管中，置于冰浴中。
●  一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100 μl，可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。應(yīng)注意所用DNA 體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一。
以下實(shí)驗(yàn)以100 μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
 Y187 感受態(tài)細(xì)胞100ul*102 向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（100 μl 的感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng 超螺旋質(zhì)粒DNA 所飽和），輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物，在冰浴中靜置30 分鐘。
3 將離心管置于42℃水浴中放置60-90 秒，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中，使細(xì)胞冷卻2-3 分鐘，該過程不要搖動(dòng)離心管。
4 向每個(gè)離心管中加入900 μl 無菌的SOC 或LB 培養(yǎng)基（不含抗生素）， 混勻后置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)1 小時(shí)（160-220 轉(zhuǎn)/分鐘），目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá)，使菌體復(fù)蘇。
 Y187 感受態(tài)細(xì)胞100ul*105 將離心管內(nèi)容物混勻，吸取100 μl 已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加到含相應(yīng)抗生素的SOB 或LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的彎頭玻棒輕輕的將細(xì)胞均勻涂開。將平板置于室溫直至液體被吸收，倒置平板，37℃培養(yǎng)12-16 小時(shí)。
●  涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來調(diào)整。如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較多，可取更少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；反之，如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較少，可取200-300 μl 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。如果預(yù)計(jì)的克隆較少，可通過離心（4,000 rpm, 2分鐘）后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于一個(gè)平板中。（涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少可以將剩下的菌液再涂布新的培養(yǎng)板）
 注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在 -70℃，不可多次凍融和放置時(shí)間過長，以避免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2. 進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時(shí)，應(yīng)根據(jù)相應(yīng)溫度及無菌條件的要求進(jìn)行。
3 為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功，可以保留部分連接反應(yīng)液，以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到低。
以下是的相關(guān)產(chǎn)品：

 SE 人金葡菌腸毒素 規(guī)格： 48T/96T

 ADAM8 人解整合素樣金屬蛋白酶8 規(guī)格： 48T/96T

 UU-Ab 人解脲脲原體抗體 規(guī)格： 48T/96T

 CNTF 人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子 規(guī)格： 48T/96T

 TB-Ab IgG 人結(jié)核菌桿抗體IgG 規(guī)格： 48T/96T

 Hpt/HP 人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 CTGF 人結(jié)締組織生長因子 規(guī)格： 48T/96T

 CTAPⅢ 人結(jié)締組織活化肽Ⅲ 規(guī)格： 48T/96T

 Des 人結(jié)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 CCA 人結(jié)腸癌抗原 規(guī)格： 48T/96T

 Cav-1 人窖蛋白Caveolin1 規(guī)格： 48T/96T

 KGF 人角化細(xì)胞生長因子 規(guī)格： 48T/96T

 KAF 人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子 規(guī)格： 48T/96T

 GDNF 人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子 規(guī)格： 48T/96T

 Collectin 人膠原凝集素 規(guī)格： 48T/96T

 Collagenase II 人膠原酶II 規(guī)格： 48T/96T

 Collagenase I 人膠原酶I 規(guī)格： 48T/96T

 HCBⅡ 人膠原蛋白Ⅱ 規(guī)格： 48T/96T

 PYD 人膠原吡啶交聯(lián) 規(guī)格： 48T/96T

 PCP 人膠原C端肽酶 規(guī)格： 48T/96T

 DAF 人降解加速因子 規(guī)格： 48T/96T

 PCT 人降鈣素原 規(guī)格： 48T/96T

 CGRP 人降鈣素基因相關(guān)肽 規(guī)格： 48T/96T

 CT 人降鈣素 規(guī)格： 48T/96T

 BFP 人堿性胎兒蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 ALP 人堿性磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T

 bFGF-9 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子9 規(guī)格： 48T/96T

 bFGF-6 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子6 規(guī)格： 48T/96T

 bFGF-4 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子4 規(guī)格： 48T/96T

 bFGF 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子 規(guī)格： 48T/96T

 Cx 人間隙連接蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 ALK 人間變性淋巴瘤激酶 規(guī)格： 48T/96T

 TAb 人甲狀腺素抗體 規(guī)格： 48T/96T

 T4 人甲狀腺素 規(guī)格： 48T/96T

 TG 人甲狀腺球蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 TAb 人甲狀腺抗體 規(guī)格： 48T/96T

 TBG 人甲狀腺結(jié)合球蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 TPO 人甲狀腺過氧化物酶 規(guī)格： 48T/96T

 Y187 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10 THAA 人甲狀腺非肽激素抗體 規(guī)格： 48T/96T

 TSI 人甲狀腺刺激免疫球蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 PTHrP 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白 規(guī)格： 4