Y187 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50?

Y187 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50? 操作方法（以下操作均按無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進行）
1 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中，如需分裝可將剛?cè)诨?xì)胞懸液分裝到無菌預(yù)冷的離心管中，置于冰浴中。
●  一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100 μl，可以根據(jù)實際情況分裝使用。應(yīng)注意所用DNA 體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一。
以下實驗以100 μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
Y187 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50? 2 向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（100 μl 的感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng 超螺旋質(zhì)粒DNA 所飽和），輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物，在冰浴中靜置30 分鐘。
3 將離心管置于42℃水浴中放置60-90 秒，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中，使細(xì)胞冷卻2-3 分鐘，該過程不要搖動離心管。
4 向每個離心管中加入900 μl 無菌的SOC 或LB 培養(yǎng)基（不含抗生素）， 混勻后置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)1 小時（160-220 轉(zhuǎn)/分鐘），目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達，使菌體復(fù)蘇。
5 將離心管內(nèi)容物混勻，吸取100 μl 已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加到含相應(yīng)抗生素的SOB 或LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的彎頭玻棒輕輕的將細(xì)胞均勻涂開。將平板置于室溫直至液體被吸收，倒置平板，37℃培養(yǎng)12-16 小時。
Y187 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50? ●  涂布用量可根據(jù)具體實驗來調(diào)整。如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較多，可取更少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；反之，如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較少，可取200-300 μl 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。如果預(yù)計的克隆較少，可通過離心（4,000 rpm, 2分鐘）后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于一個平板中。（涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少可以將剩下的菌液再涂布新的培養(yǎng)板）
 注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在 -70℃，不可多次凍融和放置時間過長，以避免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2. 進行轉(zhuǎn)化操作時，應(yīng)根據(jù)相應(yīng)溫度及無菌條件的要求進行。
3 為防止轉(zhuǎn)化實驗不成功，可以保留部分連接反應(yīng)液，以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到低。
以下是的相關(guān)產(chǎn)品：

Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

人抗SS-A/Ro抗體ELISA Kit，48T/96T 人抗SS-A/Ro抗體ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 sp100 人抗sp100抗體 規(guī)格： 48T/96T

 Sc1-70-Ab 人抗Sc1-70抗體 規(guī)格： 48T/96T

 anti-Sa-Ab 人抗Sa抗體 規(guī)格： 48T/96T

 anti-Q-Ab 人抗Q熱抗體 規(guī)格： 48T/96T

 anti-Mi2-Ab 人抗Mi2抗體 規(guī)格： 48T/96T

 anti-Ku-Ab 人抗Ku抗體 規(guī)格： 48T/96T

人抗IVIgG抗體ELISA Kit，48T/96T 人抗IVIgG抗體ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

人抗IgE受體抗體ELISA Kit，48T/96T 人抗IgE受體抗體ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 anti-IgA-Ab 人抗IgA抗體 規(guī)格： 48T/96T

 EBV 人抗EB病毒抗體 規(guī)格： 48T/96T

 anti-DNase B 人抗DNA酶B抗體 規(guī)格： 48T/96T

 BP180-Ab 人抗BP180抗體 規(guī)格： 48T/96T

 BB-Ab 人抗BB抗體 規(guī)格： 48T/96T

 LP Ag 人軍團菌抗原 規(guī)格： 48T/96T

 Agrin 人聚集蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 Agrin 人聚集蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 MIF 人巨噬細(xì)胞移動抑制因子 規(guī)格： 48T/96T

 MIP-5 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白5 規(guī)格： 48T/96T

 MIP-3β/ELC 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β 規(guī)格： 48T/96T

 MIP-3α/CCL20 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α 規(guī)格： 48T/96T

 MIP-2 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2 規(guī)格： 48T/96T

 MIP-1β/CCL4 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β 規(guī)格： 48T/96T

 MIP-1α/CCL3 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α 規(guī)格： 48T/96T

 AmAC-1 人巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1 規(guī)格： 48T/96T

 MCF 人巨噬細(xì)胞趨化因子 規(guī)格： 48T/96T

 MDC/CCL22 人巨噬細(xì)胞來源的趨化因子 規(guī)格： 48T/96T

 M-CSFR 人巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體 規(guī)格： 48T/96T

 M-CSF 人巨噬細(xì)胞集落刺激因子 規(guī)格： 48T/96T

 MAF 人巨噬細(xì)胞活化因子 規(guī)格： 48T/96T

 MSP 人巨噬細(xì)胞刺激蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 Arg 人酶 規(guī)格： 48T/96T

 AVP 人加壓素 規(guī)格： 48T/96T

Y187 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50?  MT 人金屬硫蛋白 規(guī)格： 48T/96T

8T/96T

 PTH 人甲狀旁腺激素 規(guī)格： 48T/96T