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      Y190 感受態(tài)細胞100ul*10

      更新時間:2024-11-23

      簡要描述:

      Y190 感受態(tài)細胞100ul*10是采用大腸桿菌經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于DNA 的化學轉(zhuǎn)化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達108個轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA,-70℃保存3個月轉(zhuǎn)化效率可保持在90%以上。

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      Y190 感受態(tài)細胞100ul*10以下是的訂購信息儲存條件:-70℃凍存
      操作方法:
      1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。
      2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預實驗確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
      3. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。
      Y190 感受態(tài)細胞100ul*104. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
      注意事項
      1. 加入質(zhì)粒時體積不應大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個數(shù)量級。
      2. 混入質(zhì)粒時應輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒可相應減少終用于涂板的菌量。
      3. 平板上陽性克隆密度過大時,由于營養(yǎng)不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應減少質(zhì)粒用量。
      4. 濃度不應高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長,會降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計算轉(zhuǎn)化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
      Y190 感受態(tài)細胞100ul*105. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。

       CORT 人皮質(zhì)酮/腎上腺酮 規(guī)格: 48T/96T

       Cortisol 人 規(guī)格: 48T/96T

       CLA 人皮膚淋巴細胞相關(guān)抗原 規(guī)格: 48T/96T

       SRF/IF 人皮膚反應因子/炎性因子 規(guī)格: 48T/96T

       DPT 人皮膚蛋白 規(guī)格: 48T/96T

       CTACK/CCL27 人皮膚T細胞虜獲趨化因子 規(guī)格: 48T/96T

       FSA 人胚胎性硫糖蛋白抗原 規(guī)格: 48T/96T

       CIAP 人牛小腸堿性磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T

       FⅫ 人Ⅻ 規(guī)格: 48T/96T

       FⅩⅢ 人ⅩⅢ 規(guī)格: 48T/96T

       FⅩ 人Ⅹ 規(guī)格: 48T/96T

       FⅨ 人Ⅸ 規(guī)格: 48T/96T

       Ⅷ-Ag 人Ⅷ相關(guān)抗原 規(guī)格: 48T/96T

       FⅢ 人Ⅲ 規(guī)格: 48T/96T

       FⅡ 人Ⅱ 規(guī)格: 48T/96T

       F1+2 人原片段F1+2 規(guī)格: 48T/96T

       T-TM 人血栓調(diào)節(jié)蛋白復合物 規(guī)格: 48T/96T

       TR 人受體 規(guī)格: 48T/96T

       TAT 人抗復合物 規(guī)格: 48T/96T

       Gelsolin 人凝溶膠蛋白 規(guī)格: 48T/96T

       CLU 人凝聚素 規(guī)格: 48T/96T

       gelson 人凝膠原蛋白 規(guī)格: 48T/96T

       UFC 人尿游離 規(guī)格: 48T/96T

       ALB 人尿微量白蛋白 規(guī)格: 48T/96T

       UreC 人尿素酶相關(guān)蛋白C 規(guī)格: 48T/96T

       PLAUR/uPAR 人型纖溶酶原激活物受體 規(guī)格: 48T/96T

       uPA/PLAU 人型纖溶酶原激活物 規(guī)格: 48T/96T

       uPA/PLAU 人型纖溶酶原激活物 規(guī)格: 48T/96T

       uPA 人型纖溶酶原激活物 規(guī)格: 48T/96T

       UK 人 規(guī)格: 48T/96T

       UP 人尿蛋白 規(guī)格: 48T/96T

       GDI 人鳥苷酸解離抑制因子 規(guī)格: 48T/96T

       GEF 人鳥苷酸交換因子 規(guī)格: 48T/96T

       ODC 人脫羧酶 規(guī)格: 48T/96T

       ODC 人脫羧酶 規(guī)格: 48T/96T

       OCT 人氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格: 48T/96T

      Y190 感受態(tài)細胞100ul*10 FAK 人黏著斑激酶 規(guī)格: 48T/96T

       MAdCAM-1 人黏膜地址素細胞黏附分子 規(guī)格: 48T/96T

       BDNF 人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T

       BNP 人腦鈉素/腦鈉尿肽 規(guī)格: 48T/96T

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