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      Y190 感受態(tài)細胞100ul*50

      更新時間:2024-11-23

      簡要描述:

      Y190 感受態(tài)細胞100ul*50菌株一種常用于質(zhì)粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的產(chǎn)物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實現(xiàn)a互補,可用于藍白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。

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      Y190 感受態(tài)細胞100ul*50以下是的訂購信息儲存條件:-70℃凍存
      操作方法:
      1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。
      2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預(yù)實驗確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
      3. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。
      Y190 感受態(tài)細胞100ul*504. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
      注意事項
      1. 加入質(zhì)粒時體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個數(shù)量級。
      2. 混入質(zhì)粒時應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
      Y190 感受態(tài)細胞100ul*503. 平板上陽性克隆密度過大時,由于營養(yǎng)不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
      4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長,會降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計算轉(zhuǎn)化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
      5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。

       IMA 人缺血修飾白蛋白 規(guī)格: 48T/96T

       ALD 人醛縮酶 規(guī)格: 48T/96T

       ALD 人醛固酮 規(guī)格: 48T/96T

       i-PTH 人全段甲狀旁腺素 規(guī)格: 48T/96T

       ASGPR 人去唾液酸糖蛋白受體 規(guī)格: 48T/96T

       NA 人 規(guī)格: 48T/96T

       FK 人趨化因子 規(guī)格: 48T/96T

       SRB/CD36 人清道夫受體B 規(guī)格: 48T/96T

       SM 人鞘磷脂 規(guī)格: 48T/96T

       Dsg-1 人橋粒芯糖蛋白-1 規(guī)格: 48T/96T

       Hyl 人羥賴氨酸 規(guī)格: 48T/96T

       OH-PYD 人羥基膠原吡啶交聯(lián) 規(guī)格: 48T/96T

       HRGP 人羥糖蛋白 規(guī)格: 48T/96T

       Hyp 人羥 規(guī)格: 48T/96T

       Dyn 人強啡肽 規(guī)格: 48T/96T

       LMP-1 人潛伏膜蛋白1 規(guī)格: 48T/96T

       Pro-ANP 人前心鈉肽 規(guī)格: 48T/96T

       Pro-ANP 人前心鈉肽 規(guī)格: 48T/96T

       PSA 人前列腺特異性抗原 規(guī)格: 48T/96T

       PAP 人前列腺酸性磷酸酶 規(guī)格: 48T/96T

       PGF 人前列腺素F 規(guī)格: 48T/96T

       PGE2 人前列腺素E2 規(guī)格: 48T/96T

       PGE1 人前列腺素E1 規(guī)格: 48T/96T

       PTGDS 人前列腺素D合成酶 規(guī)格: 48T/96T

       PGDS 人前列腺素D合成酶 規(guī)格: 48T/96T

       PGI 人前列環(huán)素 規(guī)格: 48T/96T

       PCP 人前膠原C端肽酶 規(guī)格: 48T/96T

       PA 人前白蛋白 規(guī)格: 48T/96T

       CALLA 人普通急性淋巴細胞白血病抗原 規(guī)格: 48T/96T

       GLUT3 人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3 規(guī)格: 48T/96T

       GLUT1 人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1 規(guī)格: 48T/96T

       GIP 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽 規(guī)格: 48T/96T

       GOD 人葡萄糖氧化酶 規(guī)格: 48T/96T

       GKRP 人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白 規(guī)格: 48T/96T

       GCK 人葡萄糖激酶 規(guī)格: 48T/96T

      Y190 感受態(tài)細胞100ul*50 GPI 人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶 規(guī)格: 48T/96T

       SPA 人葡萄球菌蛋白A 規(guī)格: 48T/96T

       Tetanus Ab 人破傷風(fēng)抗體 規(guī)格: 48T/96T

       ODF 人破骨細胞分化因子 規(guī)格: 48T/96T

       Prednisolone 人龍 規(guī)格: 48T/96T

       SMM 人平滑肌肌球蛋白 規(guī)格: 48T/96T

       Syk 人脾臟激酶 規(guī)格: 48T/96T

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