PNOS基因核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針法）

訂購(gòu)信息：
 產(chǎn)品名稱：PNOS基因核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針法）
規(guī)格：48T  0.2PCR管
編號(hào)：BH-P97068
分類：PCR-熒光探針法
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
CM-H010小氣道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL()Procaine HPLC>99%,

WM35, 色素瘤細(xì)胞伏立諾他雜質(zhì)Vorinostat impurity>98%

肝癌細(xì)胞;Hep G2 [HepG2] 大鼠肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL當(dāng)藥醇苷()SwertianolinHPLC≥98%,

原代神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells　5/2.5/1ml皂素(進(jìn)分)saponin進(jìn)分，≥10 %

MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 苦豆堿AloperineHPLC>95%,BR
支氣管平滑肌細(xì)胞cDNAHBSMC cDNABOC-L-天冬酰胺≥98.5%,BRBoc-Asn-OH

小型豬腎細(xì)胞;MPK 畸胎癌細(xì)胞，P19細(xì)胞 W256細(xì)胞，Walker氏癌肉瘤256瘤株Boc-L->98.5%,BRBoc-Gln-OH

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293 001ABoc-L- N-丁二酯BRBoc-Ala-OSu

HA Others H5N3 甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) BOC-D->98.5%,BRBoc-D-Ala-OH

CL-0240V79(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2BOC-L-天冬氨酸>98.5%,BRBoc-Asp-OH
PNOS基因核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針法）SW1990細(xì)胞，胰腺癌細(xì)胞 胸膜瘤細(xì)胞,SMC-1細(xì)胞 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E74-乙酰氧基它莫西芬美國(guó)進(jìn)口4-Acetoxy Tamoxifen

HUVEC(HUV-EC-C) (臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2N-去甲基-4-羥基它莫西芬-d5 (1:1 E/Z 混合物)美國(guó)進(jìn)口N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen-d5 (1:1 E/Z Mixture)

Promocell C-22022 Endothelial Cell GrowthMedium MV2, 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基MV2(即用型) 500ml(Z)-4-羥基-N-去甲基它莫西芬 (同分)美國(guó)進(jìn)口(Z)-4-Hydroxy-N-desmethyl Tamoxifen (mixture of isomers)

生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞裂解物HHGMCLN-去甲基-4-羥基它莫西芬 (大約1:1 E/Z 混合物)美國(guó)進(jìn)口N-Desmethyl-4-hydroxy Tamoxifen (approx. 1:1 E/Z Mixture)

IL17RB Others Human  IL17RB / IL-17 Receptor B 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (1R,4R)-N-去甲基美國(guó)進(jìn)口(1R,4R)-N-Desmethyl Sertraline
檢測(cè)步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。