牛蒡子探針法PCR鑒定試劑盒*

特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注：上述樣品建議經(jīng)過增菌后，收集培養(yǎng)物用于檢測。 
二、DNA提取：
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液，按以下說明進(jìn)行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品，并按照相應(yīng)試劑盒說明進(jìn)行操作。
1、液體培養(yǎng)物：取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中，8000rpm離心3min，盡量吸棄上清，加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物：挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品：挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中，加入0.5mL生理鹽水，振蕩混勻，13000rpm離心3分鐘，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標(biāo)本：取標(biāo)本2-3mL，13000rpm離心3min，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
注：陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取)，直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高，建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。 
實(shí)驗(yàn)流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇ne。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
氫二鈉七水   phosphate, dibasic, heptahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISA試劑盒小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

dATP溶液(100 mM)  dATP 100 mM solution  質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR 小鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA 試劑盒

癸酸鈉   decaate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,進(jìn)分 Rat somal cell derived factor 1 beta (SDF-1 beta /CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒

瓊脂糖(美侖電泳級)  Agarose  質(zhì)量規(guī)格：美侖，電泳級 Humanai-filaggrinaibody,AFAELISAKit 人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

瓊脂糖(Sigma)  Agarose  質(zhì)量規(guī)格：Sigma原裝 Human1,25-dihydroxyvitaminD3,DVD/DHVD3ELISA試劑盒人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物血凝素  Phytohemagglutinin  質(zhì)量規(guī)格：BR 真菌/酵母細(xì)胞線粒體DNA萃取試劑盒10/20

6-糠基氨基嘌呤,激動素  Kinetin,6-Furfurylamipurine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR MouseB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit小鼠B細(xì)胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

乙二醇雙(2-氨基乙基醚)四乙酸  EGTA, egtazic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級 小鼠蘋果酸脫氫酶(MDH)ELISA試劑盒 ，英文名： MDH ELISA Kit

無水二氫鈉(分子生物學(xué)級)   phosphate, mobasic, anhydrous  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,分子生物學(xué)級 小鼠白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒MouseIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T

月桂?；“彼徕c(分子生物學(xué)級)   lauroyl sarcosine  質(zhì)量規(guī)格：>95%,分子生物學(xué)級 人分泌粒蛋白1(嗜鉻粒蛋白B)(CHGB/SCG1)試劑盒 Human CHGB/SCG1 ELISA kit
Betamipron  中文名：倍他米隆  分子式：C10H113    轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

Betamethasone  中文名：  分子式：C22H29FO5    轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸檢測試劑盒   48T

Benzyl nicotinate  中文名：芐酯  分子式：C13H112    轉(zhuǎn)基因植物TE基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T              

Benzyl L-(+)-mandelate  中文名：L-(+)-扁桃酸芐酯  分子式：C15H14O3    轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

Benzyl cinnamate  中文名：肉桂酸苯甲酯  分子式：C16H14O2    轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸檢測試劑盒   48T
硫酸鋇(>98%,BR)  Barium sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 化妝品糖精(saccharin)含量比色法定量檢測試劑盒20

苯磺酸(>98%,BR)  Benzenesulfonic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 化妝品糖精(saccharin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20

安息香(>98%,BR)  Benzoin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 化妝品糖精(saccharin)含量紅外光譜法定量檢測試劑盒20

二苯甲酮腙(>98%,BR)  Benzophene hydrazone  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 化妝品糖精(saccharin)含量紫外光譜法定量檢測試劑盒20

氯化鉍(>98%,BR)  Bismuth (III) chloride  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 化妝品乙酰舒泛(acesulfameK)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20

檸檬酸鉍  Bismuth (III)   質(zhì)量規(guī)格：BR 環(huán)境副傷寒沙門氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定性試劑盒20

化鉍鉀  Bismuth (III) potassium iodide  質(zhì)量規(guī)格：BR 環(huán)境副傷寒沙門氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定性試劑盒20

硫酸鉍(>98%,BR)  Bismuth (III) sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 環(huán)境鈣離子濃度比色法定量檢測試劑盒20

堿式  Bismuth(III) subcarbonate basic  質(zhì)量規(guī)格：BR 環(huán)境鈣離子濃度比色法定量檢測試劑盒20

水楊酸鉍  Bismuth(III) subsalicylate  質(zhì)量規(guī)格：鉍含量：>56%,BR 環(huán)境鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒20
牛蒡子探針法PCR鑒定試劑盒*PCB . 35，certified 標(biāo)準(zhǔn)品 m-Tolualdehyde 37680-69-6 純品型，5MG 特征形態(tài) 固態(tài)

PCB . 34，certified 標(biāo)準(zhǔn)品 2,6-Dichlorophel 37680-68-5 純品型，5MG 特征形態(tài) 固態(tài)

PCB . 20，certified 標(biāo)準(zhǔn)品 Tri-allate 38444-84-7 純品型，10MG 特征形態(tài) 固態(tài)