元胡染料法PCR鑒定試劑盒說明書

實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

產(chǎn)品及特點(diǎn)：
本產(chǎn)品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液，濃度為2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，可大限度的減少人為誤差。使用時只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷，能避免PCR操作過程中的污染，使用時只需取適量2×TaqPCR MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去離子水補(bǔ)足體積，使MasterMix溶液濃度為1×即可進(jìn)行反應(yīng)。使用前請保證充分溶解并混勻，操作需在冰上進(jìn)行。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒。
具有高靈敏度、高特異性、高穩(wěn)定性
可在同一個管子中高特異性的執(zhí)行cDNA合成與基于探針的qPCR反應(yīng)。更多優(yōu)點(diǎn)如1.的特異性；2.多重反應(yīng)（高通量）；3.反應(yīng)體系配置，無需冰塊；4.無懼高GC含量PCR；5.預(yù)防交叉污染；6.廣泛的設(shè)備兼容性。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
CL-0125J82(人膀胱癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2酰基-β-D-葡萄糖苷酸Telmisartan Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

P3X63-Ag8.653細(xì)胞，鼠骨髓瘤細(xì)胞 人Butt`s瘤細(xì)胞,NAMALWA細(xì)胞 小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤;M5076-d4Isoniazid-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

AsPC-1(人胰腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2-d3Tiotropium-d3 Bromide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CX3CL1 Others Human 人 CX3CL1 / N 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 去乙基鹽酸胺酮-d4Desethyl Amiodarone-d4 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

兔腎細(xì)胞;RK-13去乙基鹽酸胺酮Desethyl Amiodarone 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
人胚肺細(xì)胞系;KuMA全反式甲酯all-trans Retinoic Acid Methyl Ester質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

EL4細(xì)胞，瘤細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,SW480細(xì)胞 CM-H045人肝動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL13-順式-甲酯13-cis Retinoic Acid Methyl Ester質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

Walker氏癌肉瘤256瘤株;W2566-FAM ；6-羧基熒光素6-Carboxyfluorescein質(zhì)量規(guī)格：0.95

VLDLR Others Human 人 VLDLR / VLDL Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-FAM ；5-羧基熒光素5-Carboxyfluorescein質(zhì)量規(guī)格：>95%

孔雀綠1酸鹽檢測試劑盒MGmP色素(水溶)Nigrosine water soluble質(zhì)量規(guī)格：BS
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞醋酸Gonadorelin Acetate質(zhì)量規(guī)格：>98%,單醋酸鹽

人干細(xì)胞因子單克隆抗體細(xì)胞株;AMS2(SCF3) 人頸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLGranisetron HCl質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR

人結(jié)腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞HCoMEC（標(biāo)準(zhǔn)品）Granisetron HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Hydrochlorothiazide質(zhì)量規(guī)格：度>99%,AR

KMB 人胚肺成纖維樣細(xì)胞（標(biāo)準(zhǔn)品）Hydrochlorothiazide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
元胡染料法PCR鑒定試劑盒說明書人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293);APP-PS1酸鈣，英文名或英文縮寫：Calcium iodate，級別：AR，99%，規(guī)格：5克

SUNE-1細(xì)胞，低分化鼻咽癌細(xì)胞系 鼠色素瘤細(xì)胞系,B16-Fo細(xì)胞 CM-H031人食管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mLε-己內(nèi)酯 6-Hqxcnolcctonq 20-44-3

NR8383(大鼠肺泡巨噬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2，英文名或英文縮寫：Puerarin，級別：BR，粘度50 mpe.s，規(guī)格：10克

Promocell C-2