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      黃連PCR鑒定試劑盒說明書

      更新時間:2024-11-28

      簡要描述:

      黃連PCR鑒定試劑盒說明書 二氫歐山芹素 Columbianetin 3804-70-4 分子式:C14H14O4 分子量:246.26
      補骨脂二氫黃酮甲醚 Bavachinin A 補骨脂二氫黃酮甲醚 Bavachinin A 19879-30-2 分子式:C21H22O4 分子量:338.40
      補骨脂素 Psoralen 補骨脂素 Psoralen 66-97-7

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      儲存條件:
      14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
      1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
      2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
      3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
      4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
      5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

      產(chǎn)品名稱

      黃連PCR鑒定試劑盒說明書

      英文名稱

      coptidis

      貨號

      BH-P99805

      特點:
      1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
      2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
      3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
      4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
      5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR
      6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

      使用方法:
      一、樣品采集:
      1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
      2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
      3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
      4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
      一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
      1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
      2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 765432
      3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
      4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
      5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
      6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
      7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
      注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
      二、DNA提取:
      可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進行操作。
      1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
      2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
      3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
      4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
      注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
      CL-0049CA46(Butts瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2異辛醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%)2-Ethyl-1-hexanol質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%

      Hep G2, 人肝癌細(xì)胞系 胰腺導(dǎo)管上皮癌細(xì)胞,PAN-1細(xì)胞 A3(細(xì)胞白血病細(xì)胞)2-乙基-1,3-己二醇(標(biāo)準(zhǔn)品)2-Ethyl-1,3-hexanediol質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品

      小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來自NIH3T3);PA12甲基磺草酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Mesotrione質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品

      IL1RAP Others Human IL1R3 / IL1RAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 癸酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,99.5%(GC))Methyl decanoate質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,99.5%(GC)

      中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-C十二酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Methyl laurate質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
      大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-1川陳皮素(標(biāo)準(zhǔn)品)Nobiletin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

      MGC80-3細(xì)胞,胃癌細(xì)胞 人喉癌細(xì)胞,TU212細(xì)胞 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK川楝素(標(biāo)準(zhǔn)品)Toosendanin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

      雜交瘤(B);Z153A2A5B3A12川芎嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Tetramethylpyrazine質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

      RSPO1 Others Human R-Spondin 1 / RSPO1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 川芎嗪Tetramethylpyrazine質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR

      人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪RNAHMSC-ad miRNA5 μg川續(xù)斷皂苷VI;木通皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)Asperosaponin Ⅵ質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
      小鼠原B細(xì)胞株;BaF3 小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL鹽酸棕櫚酸酯質(zhì)量規(guī)格:美國進口Clindamycin palmitate HCL

      人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs) Human亞砜質(zhì)量規(guī)格:美國進口Clindamycin Sulfoxide

      TNFRSF8 Others Human TNFRSF8 / CD30 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) R(+)-維拉帕米一鹽酸鹽水合物質(zhì)量規(guī)格:美國進口R(+)-Verapamil mono hydrate

      小鼠雪旺細(xì)胞MSC(S)-(-)-維拉帕米鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口(S)-(-)-Verapamil

      IL1R1 Others Rat 大鼠 IL1R1 / CD121a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 可的(美國進口)質(zhì)量規(guī)格:>95%,美國進口Cortisone
      黃連PCR鑒定試劑盒說明書CD86 Others Mouse 小鼠 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-NT5-核苷酸嶙酸解酶5BR,1000BAEEu/mg,櫓豆

      人肺細(xì)胞;HLF-a1,1-雙十八烷基-3,3,3,3-四基吲哚菁高錄醋鹽 1,1'-DIOCTcDqCYL-3,3,3',3'-TqTRcMqTHYLINDOCcRBOCYcNINq PqRCHLORcTq 41082-99-8

      GFRA1 Others Canine GFRA1 / GFR alpha-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
      實驗流程:
      1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
      2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

      3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
      4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
      5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
      6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
      7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
      8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None
      9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

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