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      狗脊探針法PCR鑒定試劑盒說明書

      更新時(shí)間:2024-11-28

      簡(jiǎn)要描述:

      狗脊探針法PCR鑒定試劑盒說明書公司相關(guān)產(chǎn)品 C 白花前胡丙素 Praeruptorin C 83382-71-2 分子式:C24H28O7 分子量:428.48
      異補(bǔ)骨脂素 Isopsoralen 異補(bǔ)骨脂素 Isopsoralen 523-50-2 分子式:C11H6O3 分子量:186.16
      新補(bǔ)骨脂異黃酮 Neobavaisoflavone 新補(bǔ)骨脂異黃酮

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      特點(diǎn):
      1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
      2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
      3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
      4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
      5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR
      6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

      產(chǎn)品名稱

      狗脊探針法PCR鑒定試劑盒說明書

      英文名稱

      cibotii

      貨號(hào)

      BH-P99801

      使用方法:
      一、樣品采集:
      1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
      2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
      3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
      4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
      一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
      1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對(duì)照。
      2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 765432
      3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
      4. 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
      5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
      6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
      7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
      注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測(cè)。
      二、DNA提取:
      可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進(jìn)行DNA核酸的粗提。也可采購(gòu)上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進(jìn)行操作。
      1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      注:陽性對(duì)照和陰性對(duì)照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對(duì)照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對(duì)照。
      實(shí)驗(yàn)流程:
      1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
      2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
      3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
      4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
      5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
      6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
      7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
      8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None
      9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
      儲(chǔ)存條件:
      14或-20樣品收集、處理及保存方法
      1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
      2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
      3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
      4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
      5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
      CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 頭孢磺啶鈉Cefsulodine 質(zhì)量規(guī)格:Cefsulodine> 864μg /mg,BR

      CM-R106大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL鄰苯二o-Phthalaldehyde質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR

      KYSR450細(xì)胞,人食管癌細(xì)胞 XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞,SF-295細(xì)胞 豬靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞;ZYM-SVEC01醋酸美倫孕酮; 1雌醇乙酸酯Melengestrol acetate質(zhì)量規(guī)格:USP

      CHL(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2膽酯酶;膽甾醇酯酶Cholesterol esterase 質(zhì)量規(guī)格:>300 U/mg,進(jìn)分

      CD27 Others Human CD27 / TNFRSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1,9-吡唑并蒽酮;SP600125SP600125質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,進(jìn)分,JNK抑制劑
      PADI4 Others Human PAD4 / PADI4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-乙酯鹽酸鹽H-Leu-OEt·HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%

      615小鼠癌瘤株;Ca763L-苯乙酯鹽酸鹽H-Phe-OEt.HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

      MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞,小鼠原成骨細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞系,LM-6細(xì)胞 CL-0112HMy2.CIR(B母細(xì)胞)5×106cells/瓶×2乙酯鹽酸鹽Glycine ethyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

      中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;CHLL-蛋氨酸乙酯鹽酸鹽;L-乙酯鹽酸鹽L-Mine ethyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%(T),BR

      TNFRSF1A Others Human TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-乙酯鹽酸鹽L-Tyrosine ethyl ester  質(zhì)量規(guī)格:0.98
      大鼠成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL表木栓醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:鑒別FRIEDELAN-3BETA-OL

      Lec1倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 Lec1 Chinese hamster ovary cells MEMα培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS老龍皮酸;網(wǎng)脊衣酸 A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:鑒別用(4S)-2α,3β-Dihydroxy-D:C-friedo-B':A'-neogammacer-9(11)-en-23-oic acid

      IGFBP5 Protein Canine 重組狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)焦性沒食子酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Pyrogallol

      EB (NBL-4) (牛胚氣管細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠垂體細(xì)胞RPC正十九烷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:內(nèi)標(biāo) N-NONADECANE

      胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)木蝴蝶苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Oroxin B
      狗脊探針法PCR鑒定試劑盒說明書小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11HRP標(biāo)記羊抗人纖維蛋白shēng huà shì jì容量:RT2000/

      PDGFRB Others Human CD140b / PDGFRB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鱗晴基P4-t-Bu四拂硼醋鹽 97.0% (NMR) 1-TqRT-BUTYL-4,4,4-TRIS(DIMqTHYLcMINO)-2,2-BIS[TRIS(DIMqTHYLcMINO) PHOSPHORcNYLIDq-NcMINO]-2LcMBDc5,4LcMBDc5-CcTqNcDI(PH

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