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      芡實(shí)染料法PCR鑒定試劑盒說明書

      更新時(shí)間:2024-12-04

      簡要描述:

      芡實(shí)染料法PCR鑒定試劑盒說明書公司相關(guān)產(chǎn)品ALDH2 癸二酸二(2-乙基己基)酯shēng huà shì jì容量:50毫升
      ALDH3B2 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽大鼠血清(無菌)500克
      小鼠 ALDH4A1 硅膠板GF254shēng huà shì jì容量:保存:-20℃10毫克
      ALDH7A1 明膠蛋白胨25克RT,避光
      ALDH8A1

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      儲存條件:
      14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
      1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
      2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
      3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
      4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
      5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

      產(chǎn)品名稱

      芡實(shí)染料法PCR鑒定試劑盒說明書

      英文名稱

      euryales

      貨號

      BH-P99941

      特點(diǎn):
      1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
      2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
      3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
      4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
      5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR
      6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

      使用方法:
      一、樣品采集:
      1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
      2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
      3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
      4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
      一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
      1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
      2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 765432
      3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
      4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
      5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
      6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
      7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
      注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
      二、DNA提取:
      可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進(jìn)行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進(jìn)行操作。
      1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
      注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
      JEC, 人內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系人參二醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Panaxadiol質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

      mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 小鼠胰腺癌beta細(xì)胞,Beta-TC-6細(xì)胞 EB (NBL-4)(牛胚氣管細(xì)胞)人參三醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Panaxatriol質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

      人紅系白血病細(xì)胞;TF-1人參皂苷CK(標(biāo)準(zhǔn)品)Compound K質(zhì)量規(guī)格:HPLC97%,標(biāo)準(zhǔn)品

      HAVCR1 Others Canine KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人參皂苷F1(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside F1質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

      小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]人參皂苷F2(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside F2質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
      RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞L-L-Glutamic acid質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

      3T3/e細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞,JEG-3/VP16-IL-2細(xì)胞 人腎系膜細(xì)胞RNAHRMC miRNA5 μgL-延胡索乙素L-Tetrahydropalmatine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

      恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1-d4Nicorandil-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

      EPHB4 Others Human EphB4 / HTK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-氧化物Nicorandil N-Oxide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

      EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;CGM16-羥基6-Hydroxy Nicorandil質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
      綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC-GFP釋放激素相關(guān)蛋白(1-13),人Gn-RH Associated Peptide (GAP) (1-13), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

      HL-7702細(xì)胞,人肝細(xì)胞正常 人干細(xì)胞因子單克隆抗體細(xì)胞株,AMS2細(xì)胞 敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1海沙瑞林Hexarelin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

      LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2組胺素5Histatin 5質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

      Promocell C-20011 Keratinocyte GrowthMedium 2, 角質(zhì)細(xì)胞生長培養(yǎng)基2(即用型) 500ml高鈣血癥惡性因子(1-34)酰胺,人Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), amide, human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR

      人角膜細(xì)胞HK高鈣血癥惡性因子(1-34), Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
      芡實(shí)染料法PCR鑒定試劑盒說明書腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)AdoMetS-腺甘基蛋酸100BR80%

      CSNK2A1 Others Human CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 連本三加醋水合物 1,2,3-Bqnzqnqtriccrboxylic ccid 269-21-7

      小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7;異炳基間本; 3-異炳基本; 1-異炳基-3-基本; 1--3-異炳基本; 間本異炳烷; 間異炳
      實(shí)驗(yàn)流程:
      1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
      2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

      3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
      4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
      5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
      6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
      7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
      8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None
      9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

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