使君子染料法PCR鑒定試劑盒說明書

產品及特點：
本產品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液，濃度為2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩定性好等優點，可大限度的減少人為誤差。使用時只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷，能避免PCR操作過程中的污染，使用時只需取適量2×TaqPCR MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去離子水補足體積，使MasterMix溶液濃度為1×即可進行反應。使用前請保證充分溶解并混勻，操作需在冰上進行。本產品就是為此目的根據 PCR 原理開發的試劑盒。
具有高靈敏度、高特異性、高穩定性
可在同一個管子中高特異性的執行cDNA合成與基于探針的qPCR反應。更多優點如1.的特異性；2.多重反應（高通量）；3.反應體系配置，無需冰塊；4.無懼高GC含量PCR；5.預防交叉污染；6.廣泛的設備兼容性。
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
CM-R107大鼠海馬神經元細胞*培養基100mL水溶性四氮唑-8;WST-8Water-soluble tetrazoliuM -8;GLT008質量規格：BR,>97%

Raji，人Butt's瘤細胞水溶性四氮唑-5GLT005質量規格：BR

EB病毒轉化的人B細胞;KMY0919 人成骨細胞*培養基 100mL水溶性四氮唑-4GLT004質量規格：BR

小鼠畸胎瘤細胞;F9積雪草酸Asiatic acid質量規格：HPLC≥90%,BR

SLIK4 Others Human 人 SLIK4 / Slik4 人細胞裂解液 (陽性對照) 積雪草酸（標準品）Asiatic acid質量規格：HPLC≥98%，標準品
H9c2細胞，大鼠心肌細胞 人肝癌細胞,HepG2/2-15細胞 CL-0128JeKo-1(人套細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2D-別異*D-allo-Isoleucine 質量規格：0.98

二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-D-纈氨醇 D-Valil質量規格：>98%

CD38 Others Human 人 CD38 人細胞裂解液 (陽性對照) L-L-Phenylglycil質量規格：>98%,BR

破骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)BOC-L-脯氨醇 BOC-L-Prolil質量規格：>98%,BR

NA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神經氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 絲氨醇,2-氨基-1,3- 2-Ami-1,3-propanediol 質量規格：>99%,BR
大鼠垂體細胞RPC左旋*(標準品)質量規格：>98%,標準品Levosulpiride

BeWo細胞，人胎盤絨膜癌細胞 新生牛眼晶體上皮細胞,NBLE細胞 人無色素睫狀上皮細胞HNPCEpiC左旋*質量規格：>98%,BRLevosulpiride

IAR20(大鼠肝細胞) 5×106cells/瓶×2*質量規格：>65IU/MG,BRBacitracin

786-O(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H091人大隱靜脈內皮細胞*培養基100mL 人臍動脈內皮細胞RNAHUAEC miRNA5 μg鹽酸*質量規格：>98%,USP31Amitriptyline HCl

CM-R047大鼠腸微血管細胞*培養基100mL苯磺酸*（絡活喜、安洛地）質量規格：>99%,EP 6.4,BRAmlodipine Besylate
使君子染料法PCR鑒定試劑盒說明書Ramos細胞，血細胞瘤細胞系 615小鼠前胃癌瘤株,Fc細胞 人心臟成纖維細胞-心房裂解物HCF-aa L*(標準品)質量規格：HPLC>98%,標準品Bupivacaine base

NCI-H358(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2*質量規格：>99%Cinepazide maleate

CFPAC-1(人胰腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0102Hep 3B(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠腹水瘤細胞;S-180*(標準
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR