SP6 RNA聚合酶

各位從事科研工作的小伙伴們，實(shí)驗(yàn)中所用到的試劑、配制試劑的液體，有時(shí)可能是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵，因此大家在使用時(shí)一定要留意各種試劑的級(jí)別。原則上講，純度越高越好，但是價(jià)格也就越高，所以要根據(jù)各自的需要選擇合適的品質(zhì)，避免不必要的浪費(fèi)！

SP6 RNA聚合酶
英文名稱：SP6 RNA Polymerase
其他名稱：SP6核糖核酸聚合酶
級(jí)別：BR
分子量：單體約98kDa
來源：大腸桿菌細(xì)胞，含有編碼相應(yīng)RNA聚合酶的克隆基因
濃度：20u/ul（≥100U/ul，HC）
活力定義：是指在37℃、60分鐘內(nèi)將1nmol AMP合成摻入到寡聚核苷酸片段（DE-81)光吸收形式）所需的酶量
酶活性分析混合物：40mM Tris-HCL(PH8.0), 10mM DTT, 6mM MgCL2, 2mM 亞精胺，0.5mM 各種NTP, 0.6MBq/ML(3H).-ATP和20ug/ml含有相應(yīng)啟動(dòng)子序列的質(zhì)粒DNA
保存緩沖：每種聚合酶保存于50mM Tris-HCL(PH8.0), 5mM DTT, 0.1mg/ml BSA,150mM NaC1, 0.5mM ELUGENT去污劑和50%(V/V) 甘油
5×轉(zhuǎn)錄緩沖液：200mM Tris-HCL(PH9.0,25℃), 30mM MgCL2, 50mM DTT, 50mM NaC1和10mM 亞精胺
抑制劑：金屬螯合劑，當(dāng)NaC1或KC1濃度高于150mM(SP6和T7 RNA聚合酶）時(shí)，酶活性降低超過50%，硫酸銨可使酶活性降低超過50%
失活：加入EDTA或者70℃加熱10分鐘
質(zhì)量控制：相關(guān)測(cè)試表明無內(nèi)切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染
功能測(cè)試：體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
SP6 RNA聚合酶特點(diǎn)：合成摻入特殊核苷酸，如氨基-、-、熒光素-、地辛-標(biāo)記的核苷酸
性狀(以下信息僅供參考)：液體,SP6核糖核酸聚合酶是一種依賴DNA的聚合酶，對(duì)SP6啟動(dòng)子序列表現(xiàn)高度專一性。用該酶合成RNA，僅能以SP6 DNA或克隆在SP6 啟動(dòng)下游的DNA作為合成模板。該酶能以32P，35S及3H標(biāo)記的核苷三磷酸為底物
用途：本品僅供科研，不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)合成標(biāo)記和未標(biāo)記的RNA，用于雜交、體外RNA翻譯；作為RNA、siRNA、RNase酶切保護(hù)分析的底物以及基因組DNA測(cè)序的模板；研究RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)和RNA-蛋白質(zhì)相互作用、RNA剪接；標(biāo)記的RNA探針合成，用于印跡實(shí)驗(yàn)、原位雜交、microarray雜交
保存：-20℃

產(chǎn)品規(guī)格
SP6 RNA聚合酶GR：優(yōu)級(jí)純。主成份含量很高、純度很高，適用于精確分析和研究工作，有的可作為基準(zhǔn)物質(zhì).
AR：分析純。主成份含量很高、純度較高，干擾雜質(zhì)很低，適用于工業(yè)分析及化學(xué)實(shí)驗(yàn)。
CP：化學(xué)純。主成份含量高、純度較高，存在干擾雜質(zhì)，適用于化學(xué)實(shí)驗(yàn)和合成制備。
LR：實(shí)驗(yàn)純。主成份含量高、純度較差，雜質(zhì)含量不做選擇，只適用于一般化學(xué)實(shí)驗(yàn)和合成制備。
BR：生化試劑。用于配制生物化學(xué)檢驗(yàn)試液，和生化合成。質(zhì)量指標(biāo)注重生物活性雜質(zhì)。可替代指示劑和有機(jī)合成。
BS：生物染色劑。適用于配制生物標(biāo)本染色液。質(zhì)量指標(biāo)注重生物活性雜質(zhì)。可替代指示劑和有機(jī)合成。
Ind：顯色劑。
HPLC：適用于高壓液相色譜的試劑。
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試劑開瓶的問題
隨著全自動(dòng)生化分析儀的普及，“開瓶穩(wěn)定性”也隨之受到了大家的重視，但是就目前有的試劑方法學(xué)來講，還達(dá)不到人們所要求的試劑開瓶后在儀器內(nèi)放很長時(shí)間不需要定標(biāo)，比如ALP、TP、GSP等PH為堿性的試劑，開瓶后試劑會(huì)吸收空氣中的二氧化碳，使試劑本身的PH值下降，如果長時(shí)間開瓶不定標(biāo)或校準(zhǔn)，會(huì)使檢測(cè)結(jié)果發(fā)生偏離，在國外有的項(xiàng)目有明文規(guī)定，必須72小時(shí)之標(biāo)，比如BUN。但是在國內(nèi)的某些實(shí)驗(yàn)室為了方便，很長時(shí)間都不作校準(zhǔn)，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的不準(zhǔn)確。解決辦法：了解試劑的特性，及時(shí)對(duì)部份項(xiàng)目進(jìn)行校準(zhǔn)，對(duì)于每天標(biāo)本量不多的醫(yī)院，可按1～2天的用量取用試劑放入儀器。

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