SP6 RNA聚合酶

各位從事科研工作的小伙伴們，實驗中所用到的試劑、配制試劑的液體，有時可能是實驗成敗的關鍵，因此大家在使用時一定要留意各種試劑的級別。原則上講，純度越高越好，但是價格也就越高，所以要根據各自的需要選擇合適的品質，避免不必要的浪費！

SP6 RNA聚合酶
英文名稱：SP6 RNA Polymerase
其他名稱：SP6核糖核酸聚合酶
級別：BR
分子量：單體約98kDa
來源：大腸桿菌細胞，含有編碼相應RNA聚合酶的克隆基因
濃度：20u/ul（≥100U/ul，HC）
活力定義：是指在37℃、60分鐘內將1nmol AMP合成摻入到寡聚核苷酸片段（DE-81)光吸收形式）所需的酶量
酶活性分析混合物：40mM Tris-HCL(PH8.0), 10mM DTT, 6mM MgCL2, 2mM 亞精胺，0.5mM 各種NTP, 0.6MBq/ML(3H).-ATP和20ug/ml含有相應啟動子序列的質粒DNA
保存緩沖：每種聚合酶保存于50mM Tris-HCL(PH8.0), 5mM DTT, 0.1mg/ml BSA,150mM NaC1, 0.5mM ELUGENT去污劑和50%(V/V) 甘油
5×轉錄緩沖液：200mM Tris-HCL(PH9.0,25℃), 30mM MgCL2, 50mM DTT, 50mM NaC1和10mM 亞精胺
抑制劑：金屬螯合劑，當NaC1或KC1濃度高于150mM(SP6和T7 RNA聚合酶）時，酶活性降低超過50%，硫酸銨可使酶活性降低超過50%
失活：加入EDTA或者70℃加熱10分鐘
質量控制：相關測試表明無內切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染
功能測試：體外轉錄反應
SP6 RNA聚合酶特點：合成摻入特殊核苷酸，如氨基-、-、熒光素-、地辛-標記的核苷酸
性狀(以下信息僅供參考)：液體,SP6核糖核酸聚合酶是一種依賴DNA的聚合酶，對SP6啟動子序列表現高度專一性。用該酶合成RNA，僅能以SP6 DNA或克隆在SP6 啟動下游的DNA作為合成模板。該酶能以32P，35S及3H標記的核苷三磷酸為底物
用途：本品僅供科研，不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)合成標記和未標記的RNA，用于雜交、體外RNA翻譯；作為RNA、siRNA、RNase酶切保護分析的底物以及基因組DNA測序的模板；研究RNA的二級結構和RNA-蛋白質相互作用、RNA剪接；標記的RNA探針合成，用于印跡實驗、原位雜交、microarray雜交
保存：-20℃

產品規格
SP6 RNA聚合酶GR：優級純。主成份含量很高、純度很高，適用于精確分析和研究工作，有的可作為基準物質.
AR：分析純。主成份含量很高、純度較高，干擾雜質很低，適用于工業分析及化學實驗。
CP：化學純。主成份含量高、純度較高，存在干擾雜質，適用于化學實驗和合成制備。
LR：實驗純。主成份含量高、純度較差，雜質含量不做選擇，只適用于一般化學實驗和合成制備。
BR：生化試劑。用于配制生物化學檢驗試液，和生化合成。質量指標注重生物活性雜質。可替代指示劑和有機合成。
BS：生物染色劑。適用于配制生物標本染色液。質量指標注重生物活性雜質。可替代指示劑和有機合成。
Ind：顯色劑。
HPLC：適用于高壓液相色譜的試劑。
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試劑開瓶的問題
隨著全自動生化分析儀的普及，“開瓶穩定性”也隨之受到了大家的重視，但是就目前有的試劑方法學來講，還達不到人們所要求的試劑開瓶后在儀器內放很長時間不需要定標，比如ALP、TP、GSP等PH為堿性的試劑，開瓶后試劑會吸收空氣中的二氧化碳，使試劑本身的PH值下降，如果長時間開瓶不定標或校準，會使檢測結果發生偏離，在國外有的項目有明文規定，必須72小時之標，比如BUN。但是在國內的某些實驗室為了方便，很長時間都不作校準，導致測定結果的不準確。解決辦法：了解試劑的特性，及時對部份項目進行校準，對于每天標本量不多的醫院，可按1～2天的用量取用試劑放入儀器。

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